人肿瘤坏死因子-α基因转导对绒癌耐药细胞系JEG-3/VP2耐药性逆转的体内外研究

来源 :中国协和医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hwren
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:绒癌是发生于生育年龄妇女的高度恶性肿瘤,对化疗敏感,是人类最早治愈的实体瘤之一。化疗是绒癌的主要治疗方法,对化疗药物产生耐药是治疗失败的主要原因。耐药病人的死亡率仍徘徊在60%左右,对耐药患者的治疗策略亟待更新。绒癌的耐药多数为获得性耐药,因此逆转肿瘤已经形成的多药耐药,是进一步提高绒癌治疗的有效途径。本研究拟应用基因工程技术将细胞因子基因(huTNF-α)导入已建立的绒癌耐药细胞系JEG-3/VP2,观察huTNF-α基因转导对绒癌细胞耐药性逆转的体内外作用。 方法:本研究用RT-PCR的方法克隆huTNF-α基因,经酶切、连接将huTNF-α基因插入真核表达载体pcDNA3.1-myc-his(-)中,提取质粒,用阳离子脂质体将huTNF-α基因导入绒癌耐药细胞系JEG-3/VP2中,用G418筛选含huTNF-α cDNA片段的单细胞克隆,检测转导后细胞对VP-16耐药指数的变化。用RT-PCR的方法,测定转导前后细胞MDR1mRNA的表达情况。建立绒癌耐药细胞系裸鼠移植瘤模型,测定转导前后移植瘤的瘤重,用RT-PCR方法和免疫组织化学方法,检测huTNF-α基因转导后,绒癌耐药细胞移植瘤中MDR1mRNA和MDR1蛋白(P-gp)表达水平的改变。 结果:转导huTNF-α基因的绒癌耐药细胞中有huTNF-α mRNA的表达,对VP-16的耐药性与未转导细胞相比明显下降(P<0.05),MDR1mRNA的表达水平明显下降。转导huTNF-α基因的绒癌耐药细胞系的瘤重明显低于未转导组,差异有显著性(P<0.05)。转导huTNF-α基因的移植瘤耐药性明显下降,MDR1mRNA和MDR1蛋白表达水平明显低于未转导耐药细胞(P<0.05)。 结论:huTNF-α基因的转导的确能在mRNA水平和蛋白水平逆转耐药绒癌的MDR1,增加绒癌耐药细胞对细胞毒性药物的敏感性,降低其致瘤性。
其他文献
对换流变压器空载合闸引起的励磁涌流进行研究是特高压直流工程过电压、滤波器设计以及保护配置的重要依据之一。为研究特高压直流换流变压器励磁涌流产生的原因,结合铁磁性
胸腔镜肺叶切除术可用于治疗可切除的肺癌,即胸腔镜下肺叶切除术可用于治疗肺良性病变或早期恶性病变,且胸腔镜操作较传统开胸手术操作简单,切口较小,可降低术中切口引起的机
带状疱疹是由带状疱疹病毒引起的,沿周围神经分布的群集疱疹及神经痛为特征的病毒性皮肤病。本病常突然发病,皮肤出现簇集状小水疱,沿一侧神经呈带状分布,伴有局部刺痛。成年
复刚度是衡量汽车悬置性能的重要指标。已有文献往往只考虑橡胶悬置主方向的复刚度,此次试验将对3个方向参数分别进行测试,为后期振动分析提供更全面的科学依据。为了克服单
1病例资料患者,男,64岁,52kg。术前诊断为冠心病,风湿性心脏病,二尖瓣重度狭窄,主动脉瓣轻度返流。心电图示左室肥厚,房颤;胸部X线片为肺静脉高压征,二尖瓣心型,左房明显增大
目的:探讨腹腔镜下子宫全切术、围术期护理方式及效果。方法:选择子宫全切术患者共45例,予以腹腔镜辅助手术治疗及全面、优质护理;另选择接受传统阴式子宫全切术治疗与常规护理
目的观察中药结肠透析治疗慢性肾衰竭(CRF)的临床疗效,探讨其护理方法。方法共63例患者,给予中药结肠透析治疗,连续治疗20d为1个疗程。结果显效27例,好转30例,无效6例,总有效率
近些年来,我国高压直流输电工程的发展达到了前所未有的高度,为了满足直流输电的发展需要,作为高压直流输电系统重要设备的换流变压器也得到了越来越多的研究。直流电网和地
阅读是一种复杂的认知活动,阅读材料的类型和质量在很大程度上影响着学生的认知发展,由于文学作品本身的普适性、内涵丰富性、原创性和文学性等价值特征,越来越受一线英语教师的重视,在高中英语阅读教学中加强对文学作品阅读教学的重视,对发展学生的语言能力、培养学生的思维品质和涵养学生的文化品格有重要的意义,英语文学阅读为学生的思辨提供思想的材料和思维的空间,是阅读教学重要的语言素材。为深入了解高中英语文学作品