Ⅱ型糖尿病（Type 2 diabetes mellitus,T2DM）是一种代谢性疾病,特征是持续的高血糖。机体持续高血糖会加重患者病情,进而演变成糖尿病并发症,对人体健康和生活质量造成严重的损害。越来越多的研究表明,人参皂苷具有降低血糖,改善T2DM的作用,且几乎无毒副作用。但不同的人参皂苷对T2DM的作用机制尚不清楚。本课题首先通过从人参总皂苷中经提取、转化、分离等过程得到高纯度的人参皂苷Rk3和Rh4,然后通过建立T2DM小鼠模型及体外细胞模型,分别在体内和体外探究了人参皂苷Rk3和Rh4对T2DM的作用效果及机制,从而为人参皂苷Rk3和Rh4临床治疗T2DM提供研究基础。本论文的主要研究内容如下:（1）人参皂苷Rk3和Rh4的制备本文以三七根为研究对象,通过优化提取条件后,得到提取物中人参总皂苷的含量为44.41%。优化树脂类型后发现经D101大孔吸附树脂可分离出人参三醇组皂苷。接下来,采用高温酸水解法将其转化为稀有人参皂苷,通过单因素和响应面实验优化高温酸水解条件,发现当柠檬酸浓度为8 mmol/L,反应温度为110℃,反应时间为4h,转化得到的稀有人参皂苷含量最高。为了提高稀有人参皂苷中Rk3和Rh4的混合物的含量,通过优化树脂类型,发现经D101大孔树脂可得到70%以上的人参皂苷Rk3和Rh4的混合物。最后,采用HPLC对其进行分离纯化,最终得到纯度均大于98%的人参皂苷Rk3和Rh4。（2）人参皂苷Rk3对T2DM的作用效果及机制本文通过采用HFD/STZ诱导T2DM小鼠模型,经口分别给予（30 mg/kg bw）和（60 mg/kg bw）的Rk3连续4周,检测各组小鼠血清水平发现高剂量Rk3可以有效降低T2DM小鼠FBG水平,改善糖耐量和胰岛素抵抗。血清和油红O染色实验等验证Rk3可抑制T2DM小鼠脂质积累。试剂盒检测、q PCR和蛋白免疫印迹实验表明Rk3可以抑制T2DM小鼠炎症水平。流式细胞术、蛋白免疫印迹和q PCR实验表明Rk3可以改善T2DM小鼠胰岛素敏感性、抑制肝脏糖异生和肝脏脂质积累。接下来,本文进一步研究了Rk3作用于肝糖异生和脂质积累的信号通路,发现Rk3可以激活IR-Hep G2细胞AMPK/Akt通路,从而改善糖脂代谢紊乱。这些结果说明Rk3通过调节AMPK/Akt信号通路达到改善T2DM的效果,有望成为一种新型降糖药物,为临床应用提供重要参考。（3）人参皂苷Rh4对T2DM的作用效果及机制。本文通过分别给予HFD/STZ诱导的T2DM小鼠人参皂苷Rh4（20 mg/kg bw）和（40 mg/kg bw）连续4周,治疗结束后检测各组小鼠血清水平发现高剂量Rh4可以显著降低T2DM小鼠FBG水平,改善血脂异常。通过高通量测序、q PCR、透射电镜、免疫荧光染色和蛋白免疫印迹实验验证了Rh4可以显著增加T2DM小鼠胰腺组织抗氧化能力,并改善胰岛β细胞功能,促进胰岛素分泌。为了进一步从氧化应激和胰岛素信号转导层面探讨Rh4改善T2DM的作用机制,通过建立四氧嘧啶诱导的氧化损伤的INS-1细胞模型,利用免疫组化、GSIS和蛋白免疫印迹实验验证Rh4促进了Nrf2核易位,上调了HO-1、NQO1和GCLC的表达。此外,本研究还发现Rh4通过激活PDX-1、Glut2和GCK表达而增加了胰岛素分泌。更重要的是,Rh4对四氧嘧啶诱导的Nrf2及抗氧化基因的上调和胰岛素分泌的保护作用通过Nrf2si RNA沉默Nrf2而被消除。最后,为了探索Rh4对Nrf2激活相关的上游信号靶点,发现Akt缺失抑制了Rh4介导的Nrf2核易位。因此,研究推测Rh4激活Nrf2信号通路对胰岛β细胞的保护作用可能是通过调节p-Akt水平来实现的。这为人参皂苷Rh4在临床上治疗T2DM提供了重要参考。综上所述,本研究通过体内外实验表明人参皂苷Rk3通过激活AMPK/Akt信号通路抑制肝脏糖异生、减少肝脏脂质积累;人参皂苷Rh4通过激活Akt介导的Nrf2及其靶基因的表达改善胰岛β细胞功能障碍。这为人参皂苷Rk3和Rh4在临床上治疗T2DM提供了有效的理论依据。