1938年Shanks首先报道了猪水肿病(Edema Disease Of Swine，ED)。Sojka(1965)认为仔猪在断乳后很短一段时间内发生水肿病是由某种血清型的E.coli引起的。后来，猪水肿病在世界各地都有发生，我国也常见报道，是多年来困扰我国养猪业的问题之一。猪水肿病呈地方性流行，或零星散发。在发病的猪群中，发病率为30～40％，该病死亡率高，可达80％～100％。该病受地区环境、季节气候、饲养管理条件的影响很大。该病主要发生在断乳后1～2周的仔猪，尤其在发育良好的仔猪群，造成很大的经济损失，是断奶仔猪危害较严重的疾病。该菌能产生Vero细胞毒素，且其毒素可被抗志贺氏毒素抗血清中和，又称为志贺样毒素大肠杆菌(Shiga-like toxinic Escherichia coli,SLTEC)。而产SLT-IIe毒素的更是致水肿病的主要病原，它能损伤血管内皮细胞，或引起细胞坏死和组织病变；除了SLT-IIe毒素之外，其另外一个毒力因子为菌毛F18，它有助于细菌在猪肠黏膜上皮定居与繁殖；部分菌株可能还产生LT及ST。 本研究分离了57株致猪水肿病大肠杆菌，对其中7株进行了形态学、培养特性试验、生化特征、致病性试验、毒力因子的PCR检测的研究。结果表明，上述7株菌形态学、培养特性试验、生化特征符合大肠杆菌，对小鼠有较强的致病性，引起小鼠死亡；7株菌肉汤培养物的无菌滤液能致死小鼠且剖检见相关脏器水肿；对7株菌主要毒力基因SLT-IIe及F18扩增，SLT-IIe全部阳性，5株F18为阳性，对LT1及ST1扩增，则全为阴性。7株药敏试验证明各菌株的耐药谱不同。7菌株感染断奶仔猪，均能复制水肿病。 本研究挑选菌株ED3(O139)，该菌对小鼠致病力最大，测定了其对小鼠的半数致死量(LD50)，该菌对小鼠的半数致死量为2.55×10~8 CFU。另外制备了多价灭活菌体抗原，对其小鼠的免疫原性进行了研究。我们用微量凝集法对菌体抗体进行了测定，第7天可测到抗体，效价(GMT)为1：8；28天效价达到最高为1：128；55天仍然维持较高抗体效价1：64。 F18菌毛是致猪水肿病的产Vero细胞毒素大肠(VTEC)及某些产肠毒素大肠杆菌(ETEC)的主要毒力因子之一。菌毛F18主要亚单位有fedA、fedB、fedC、fedE及fedF，fedF基因与菌毛长度相关，并是发挥黏附功能不可缺少的因子。本研究建立了fedF的PCR检测方法，对404株致病性大肠杆菌进行了扩增，其中48株阳性，阳性率为11.9％。 根据Genbank的序列设计两对引物，用PCR的方法扩增了大肠杆菌菌毛F18基因的主要亚基fedF的全长及去掉信号肽的亚克隆，扩增的片段大小约为1.0kb及0.9kb。将纯化的扩增产物克隆到pMD-18T中，上下游酶切位点为Sacl、 华中农业人学硕士学位论文Hindm，酶切分析证实所得阳性克隆，序列分析结果表明，含酶切位点的全长为%7bP，鄂E株fedF基因编码区全长903bP，编码300个氨基酸的蛋白质，碱基序列同107/86株相比同源性为100%。与菌毛A卫瓜1比较，编码的蛋白质没有同源性，fedF基因高度保守，是研制疫苗的良好候选基因。用pGEx一KG构建了表达载体，SDS一PAGE表明pGEX一KG一fedFc无表达带，pGEX一KG一fedFs则有强特异性表达带，W七stem blot结果表明表达的蛋白质具有免疫原性。制备的抗血清具有生物学活性，能抑制菌毛F18+Escherichia coli与刷状缘细胞的勃附。为基因工程亚单位苗及新型疫苗的研制打下了坚实的基础。