【摘 要】
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背景:肺癌是全球范围内最常被诊断出的恶性肿瘤。其中,非小细胞肺癌（Non-small cell lung cancer,NSCLC）病例数占所有肺癌患者数量的 85%。因此,发现并鉴定出有关非小细胞肺癌新的诊断与预后生物学标志物显得尤为重要。近年来有大量新兴证据证实,长链非编码RNA（Long-noncoding RNA,lncRNA）的失调与非小细胞肺癌的发生发展密切相关,并且为非小细胞肺癌的诊
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背景:肺癌是全球范围内最常被诊断出的恶性肿瘤。其中,非小细胞肺癌（Non-small cell lung cancer,NSCLC）病例数占所有肺癌患者数量的 85%。因此,发现并鉴定出有关非小细胞肺癌新的诊断与预后生物学标志物显得尤为重要。近年来有大量新兴证据证实,长链非编码RNA（Long-noncoding RNA,lncRNA）的失调与非小细胞肺癌的发生发展密切相关,并且为非小细胞肺癌的诊断和治疗提供了一些新的评判标准与治疗思路。然而,仍有大量lncRNA在非小细胞肺癌中的表达、功能以及作用机制亟待发现与探究。方法:采用基因芯片数据分析、RNA-Seq数据验证并结合实时荧光定量PCR技术,筛选出在TGF-β处理和非处理条件下的三种NSCLC细胞系中差异表达的目标lncRNA。随后通过核质分离、RNA荧光原位杂交技术鉴定目标lncRNA的生物学特性及亚细胞定位。构建稳定高、低表达目标lncRNA及相应对照组NSCLC细胞株,通过Transwell和Wound healing实验探查目标lncRNA对NSCLC细胞转移与侵袭能力的影响程度,通过CCK-8、克隆形成和流式细胞术实验检测目的lncRNA对NSCLC细胞增殖、克隆形成能力以及细胞周期的影响。结果:lncRNA RPARP-AS1在TGF-β处理条件下的三种NSCLC细胞中表达水平显著下调。细胞表型实验结果显示,RPARP-AS1的表达水平与NSCLC细胞转移、侵袭能力呈负相关,RPARP-AS1的上调显著抑制了 NSCLC细胞的增殖、克隆形成能力以及诱导细胞G1期停滞、S期细胞数量下降,而下调RPARP-AS1则与上述作用相反。结论:我们首次发现RPARP-AS1是一个与NSCLC相关的lncRNA,通过上调它的表达能够显著抑制NSCLC细胞转移、侵袭、增殖、克隆形成及细胞周期更新的能力。
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