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目的观察益气活血通络方对2型糖尿病模型小鼠(db/db小鼠)周围神经的保护作用及其与JNK信号通路的相关性,探讨益气活血通络方对糖尿病周围神经的保护作用机制,为其临床合理应用奠定理论基础。方法40只7周龄db/db小鼠适应性喂养一周后,按照随机原则分成5组:益气活血通络方高、益气活血通络方中剂量组、益气活血通络方低剂量组,模型组,硫辛酸组,另设8只同窝出生的非糖尿病小鼠(db/m小鼠)作为正常组。正常组和模型组给予10ml/kg生理盐水灌胃,益气活血通络方各剂量组分别按6.4g/kg、3.2g/kg、1.6g/kg灌服益气活血通络方混悬液,西药硫辛酸组按78mg/kg灌服硫辛酸混悬液,每天一次,连续8周。观察并记录小鼠一般情况,实验八周末测定各组小鼠足底热敏反应时间和坐骨神经运动传导速度,透射电镜观察各组小鼠坐骨神经超微结构变化;ELISA法检测各组小鼠血清中炎性因子TNF-α和IL-1β的含量,Western blot法检测小鼠背根神经节(DRG)中JNK信号通路相关蛋白含量,RT-PCR法检测小鼠坐骨神经中促凋亡基因P53 mRNA和Bax mRNA表达情况。结果1.益气活血通络方对db/db小鼠坐骨神经结构和功能的影响与正常组小鼠相比,模型组小鼠坐骨神经运动传导速度减慢,足底热敏反应时间延长(P<0.01),坐骨神经超微结构破坏严重;与模型组比较,益气活血通络方可以提高小鼠坐骨神经运动传导速度,缩短足底热敏反应时间(P<0.01或P<0.05),显著改善坐骨神经病理损伤。2.益气活血通络方对db/db小鼠血清炎性因子的影响与正常组小鼠比较,模型组小鼠腹主动脉血清中IL-1β和TNF-α含量明显升高(P<0.01);与模型组小鼠相比,益气活血通络方能够降低腹主动脉血清中IL-1β及TNF-α的水平(P<0.01或P<0.05),减轻炎症反应。3.益气活血通络方对db/db小鼠JNK信号通路相关蛋白和基因表达的影响与正常组小鼠相比,模型组小鼠背根神经节中JNK信号通路相关蛋白MEKK1、MLK3、MEK7、JNK、p-JNK含量增加(P<0.01或P<0.05);与模型组小鼠比较,益气活血通络方可以降低JNK信号通路中JNK、p-JNK、MEK7、MLK3、MEKK1等蛋白的表达水平(P<0.01或P<0.05)。4.益气活血通络方对db/db小鼠坐骨神经中促凋亡基因P53 mRNA、Bax mRNA表达的影响与正常组小鼠相比,模型组小鼠坐骨神经组织中JNK信号通路下游促凋亡基因P53 mRNA、Bax mRNA表达增多(P<0.01);与模型组小鼠比较,益气活血通络方能够抑制促凋亡基因P53 mRNA和Bax mRNA的表达(P<0.01或P<0.05)。结论益气活血通络方能够改善db/db小鼠坐骨神经的结构和功能,对db/db小鼠周围神经具有一定的保护作用,其作用机制可能与抑制JNK信号通路的异常激活,减轻db/db小鼠炎症反应,减少神经细胞凋亡相关。