迷迭香酸抗过氧化氢诱导血管平滑肌细胞凋亡作用的研究

来源 :南华大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:zhangjianfa11
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研究背景:血管平滑肌细胞的凋亡参与了动脉粥样硬化的发生、发展以及斑块破裂损伤的整个过程,在斑块形成、血管重构、斑块破裂以及血栓形成中起重要的作用。因此,控制血管平滑肌细胞凋亡目前已经成为稳定动脉粥样硬化斑块和防止严重后果的一个新思路。迷迭香酸是一种天然的水溶性酚类化合物,具有抗氧化、抗炎症、拮抗细胞内高钙等作用。我们曾观察到迷迭香酸在培养的ECV 304细胞上能通过上调Bcl-2蛋白和下调Bax蛋白来拮抗H2O2诱导的凋亡,但是其对体外培养的血管平滑肌细胞的氧化应激损伤及凋亡的影响尚不清楚,本实验旨在探讨迷迭香酸对H2O2诱导的血管平滑肌细胞凋亡的影响,为开发药物新的药理作用提供理论依据。 方法:首先用不同浓度的H2O2处理体外培养的大鼠血管平滑肌细胞24小时,流式细胞术检测凋亡率,AO染色观察形态学变化,确定H2O2最佳浓度,然后将培养的血管平滑肌细胞按如下分组处理:①正常对照组;②H2O2处理组;③迷迭香酸(10、20、40μmol/L)+H2O2组;④阳性药Vit E+H2O2组;在不同浓度迷迭香酸或阳性药预处理30分钟后,加入最佳浓度的H2O2继续培养24小时,采用MTT法检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western-Blotting检测细胞中Bcl-2、Bax、Fas和Fas L蛋白的表达。所有细胞在实验之前均经过无血清同步化处理24小时。
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