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现代科技的迅速发展,人们日益增长的物质文化需求跟森林资源的供给不足之间的矛盾日益扩大,提出新的可代替森林资源进行纸浆造纸的方式迫在眉睫。面对森林资源匮乏的局面,利用二次纤维重复利用生产的脱墨浆成为众多纸浆造纸厂家的应对木材原料不足的主要手段。为了能够更好地适应未来脱墨造纸厂家生产的实际需求,达到较好的二次纤维回收效率和脱墨效果,本实验在同课题组研究出脂肪酶和木聚糖酶的最佳使用比例的基础上,在NCBI上筛选适宜的α-淀粉酶并分别高效表达了两种α-淀粉酶BlAmy和AmyK,选择了具有更高酶活力的AmyK和脂肪酶、木聚糖酶以一定比例复配,对三种废纸(混合办公废纸、书刊杂志纸和废旧报纸)进行了脱墨效果评价,并利用纤维质量分析仪、XRD和FTIR等仪器对脱墨的机理进行了讨论,具体的实验结果如下:重组毕赤酵母GS115/pHKA-BlAmy经摇瓶发酵144h,发酵上清液淀粉酶酶活达到5.82U/m L。重组α-淀粉酶BlAmy最适pH为8,在较宽的pH范围(6~10)都能保持60%以上的pH稳定性;BlAmy最适温度为40℃,在40℃的温度下保温210min能够维持60%以上的酶活力。重组毕赤酵母GS115/pPIC9K-AmyK在摇瓶发酵120h时,发酵上清液淀粉酶酶活达到5984U/m L。重组α-淀粉酶AmyK最适pH为6,虽然最适pH是中性偏酸的,但是在pH6~8的范围内都能保持80%以上的pH稳定性;AmyK最适温度为50℃,在50~70℃的温度范围内下持续保温30min依然能够维持60%以上的酶活力。经过3L大罐发酵,AmyK大罐发酵酶活力较摇瓶发酵提高了7.7倍,达到了40200U/mL。复合酶制剂XLA对混合办公废纸(MOW)脱墨效果很好。XLA中淀粉酶最佳使用量为30U/g绝干浆,在此条件下,脱墨浆的白度最高而ERIC最低,脱墨效率达到2.94%;淀粉酶的加入能进一步有效改善XL酶法脱墨浆的强度,XLA(30)脱墨浆的抗张、撕裂和耐破指数都有所提高;淀粉酶能辅助减少MOW细小纤维含量,提高重均纤维长度,改变了纤维的卷取指数和扭结指数;脱墨浆的结晶度在XLA(30)的条件下最高,与前面研究中XLA(30)脱墨浆的强度最高是一致的。化学法对于MOW这类非接触性印刷纸脱墨效果不佳。复合酶制剂XLA对书刊杂志废纸(PHOT)脱墨效果同样很理想。XLA中淀粉酶最佳使用量为50U/g绝干浆,在此条件下,脱墨浆的脱墨效率最高为13.63%;淀粉酶的加入能一定程度上提高脱墨浆的强度,XLA(50)脱墨浆较XL,抗张和撕裂指数都有所提高,耐破指数有所下降;淀粉酶同样能辅助减少PHOT细小纤维含量,提高重均纤维长度,改变了纤维的卷取指数和扭结指数;脱墨浆的结晶度在XLA(50)的条件下最高,与前面研究中XLA(50)脱墨浆的强度得到改善是一致的。化学法对于PHOT具有脱墨效果,但是脱墨效率不如酶法脱墨。复合酶制剂XLA对混合办公废纸(ONP)脱墨效果不理想,少量淀粉酶的加入对脱墨浆的光学性质没有明显的减弱,即没有提高白度或降低ERIC,相反而言过量的淀粉酶对脱墨浆的光学性质产生副效果。淀粉酶使用量为10U/g绝干浆时XLA脱墨浆的白度最高而ERIC最低;与XL脱墨浆比较,淀粉酶的加入损伤了脱墨浆的强度,XLA(10)脱墨浆的抗张、撕裂指数下降,但是耐破指数有所提高;淀粉酶的加入增加了ONP细小纤维含量,降低了重均纤维长度,改变了纤维的卷取指数和扭结指数;脱墨浆的结晶度在XLA(10)的条件下最低,与前面研究中XLA(10)脱墨浆的强度受损是一致的。脂肪酶和木聚糖酶两酶联用的脱墨效果好于三酶联用的效果。