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临床部分目的:基于“下丘脑-垂体-卵巢”(HPO)轴探讨培元通经推拿治疗卵巢储备功能低下(DOR)的临床疗效及安全性。方法:选取2020年11月至2021年11月期间就诊的DOR患者72例纳入研究,采用随机数字表法,将其按照就诊先后顺序分为对照组和观察组,每组各36例。对照组给予口服戊酸雌二醇片(补佳乐,1mg/d,连续21d)和地屈孕酮片(达芙通,10mg/d,连续10d)周期治疗,共重复2个月经周期;观察组在西药周期治疗基础上加用培元通经推拿法治疗,取穴气海穴、关元穴、中极穴、归来穴、子宫穴、卵巢穴,自西药周期治疗开始,每日进行1次,连续治疗6天停1天,至西药周期治疗结束。观察并比较患者治疗前及治疗后的月经情况、中医证候评分和血清基础性激素水平,在月经周期2~5天行阴道超声检查,测量并计算双侧窦卵泡计数(AFC)、卵巢体积(OV)及患者卵巢间质动脉血流信号。以中医证候疗效百分数评定疗效,监测患者治疗期间的不良事件。治疗后随访6个月,观察并记录患者复发情况。结果:本研究共计纳入DOR患者72例,在治疗加随访过程中观察组脱落3例,有33例患者完成试验,对照组脱落2例,有34例患者完成试验。与治疗前比较,两组治疗后的各项月经指标评分和中医症状评分均较治疗前显著降低(P<0.05);与对照组比较,观察组治疗后的经量、经色、经质、月经总评分及各项中医症状评分均较对照组显著降低(P<0.05),两组间月经周期、经期比较未见统计学差异(P>0.05)。与对照组比较,观察组治疗后的FSH、E2水平、FSH/LH比值及PI、RI指数、S/D比值均较对照组显著降低(P<0.05),P及PSV、EDV值均较对照组显著升高(P<0.05),两组间LH、AMH值及AFC、OV比较差异未见统计学意义(P>0.05),但观察组治疗后较对照组可见更明显的改善趋势。观察组治疗后的有效率(90.9%),明显高于对照组的有效率(70.6%),组间比较差异有统计学意义(X~2=4.422,P<0.05)。治疗结束后随访6个月,观察组复发率为15.15%(5/33),对照组复发率为29.41%(10/34),观察组较对照组的复发率更低。治疗期间两组患者均未出现严重的不良反应,总体上具有较高的安全性。结论:采用培元通经推拿法联合西药周期治疗方案用于DOR的治疗,能够明显增强疗效和降低复发率,有效改善DOR患者的月经紊乱症状和血清基础性激素水平,增加卵巢间质动脉的血流灌注,有效改善盆腔微循环,以促进卵巢储备功能的恢复。该方法具有较高的安全性,值得在临床上推广应用。实验部分目的:通过构建大鼠DOR模型,观察培元通经推拿法对大鼠生殖系统的影响。在动物实验水平上初步探究培元通经推拿法对改善卵巢储备功能的影响极其相关机制,为培元通经推拿法的进一步应用提供科学依据。方法:采用雷公藤多苷片混悬液灌胃建立大鼠DOR模型,并检测DOR大鼠动情周期改变。将造模成功的大鼠随机分为空白对照组、模型组、培元通经推拿组、西药组和西药+培元通经推拿联合治疗组,各组按照规范连续治疗21天。治疗完成后检测大鼠动情周期,子宫和卵巢形态结构,卵泡分级和数量,血清中E2、LH、AMH和FSH等激素表达,以及组织Gn RH、E2、LH、AMH和FSH的表达水平。根据以上指标综合衡量培元通经推拿法对DOR大鼠的治疗效果。进一步,采用RNA测序技术获取经培元通经推拿法治疗后大鼠卵巢的差异基因,通过GO功能富集、KEGG通路富集、Reactome分析以及PPI网络构建分析培元通经推拿法治疗大鼠DOR的潜在机制。结果:DOR模型组大鼠多呈现精神沉郁、反应迟钝和动情周期紊乱。显微结构可见,DOR大鼠卵巢中出现卵泡数量明显减少、卵泡发育不良等现象,子宫结构可见腺体分布明显减少、子宫内膜上皮细胞出现叠层等现象,提示大鼠DOR模型构建成功。通过治疗干预发现,培元通经推拿法可以改善DOR大鼠卵巢和子宫的结构和功能,增加了生长卵泡数量,降低大鼠血清LH和FSH水平(P<0.05),使AMH和E2水平(P<0.05)升高,并降低下丘脑Gn RH表达水平(P<0.05)。培元通经推拿法联合西药治疗效果最佳,其单独治疗效果和西药治疗效果相似。根据实验结果,培元通经推拿法可以调节“下丘脑-垂体-卵巢”轴,进而发挥改善大鼠DOR的调节作用。进一步,通过RNA测序和生物信息学分析发现,培元通经推拿法可以通过多靶点、多途径发挥DOR改善作用,其中花生四烯酸代谢途径具有较高的相关性和基因富集数量。经RT-q PCR和Western blot验证,培元通经推拿法治疗可以显著提高COX-2和ALOX15的m RNA和蛋白表达(P<0.05),激活花生四烯酸代谢通路;相反,西药治疗不会调节该代谢途径。结论:动物实验证明,培元通经推拿法可以通过单独使用或与西药联合治疗改善DOR大鼠卵巢储备功能,提高卵泡数量和卵母细胞质量。培元通经推拿法改善DOR的机制之一可能是通过激活花生四烯酸代谢通路实现的。