菌根共生提高酸枣耐盐性机制研究

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枣树(Ziziphus jujuba Mill.)是我国重要的经济林树种,是西北地区乡村振兴的重要产业树种,而西北地区土壤盐渍化严重,是影响枣树生长的主要逆境因素。酸枣(Ziziphus acidojujuba Mill.)耐盐碱、干旱能力强,作为枣的砧木,在生产中广泛使用。酸枣是典型的丛枝菌根共生树种,菌根共生能提高枣树抗盐能力,但其维持离子稳态的生理及分子机制尚不清楚。本研究以酸枣幼苗和异型根孢囊霉(Rhizophagus irregularis,RI)为材料,通过不同浓度Na Cl处理,研究菌根共生和Na Cl胁迫下酸枣幼苗的生长状况、光合作用、激素含量和对离子稳态的响应,并通过比较转录组分析,揭示盐胁迫下,菌根共生提高酸枣的耐盐性的生理和分子调控机制。主要研究结果如下:(1)盐胁迫对酸枣幼苗生长有显著的抑制作用,随着Na Cl处理浓度的升高,酸枣幼苗的生物量显著降低,新叶生长受抑制。处理13 d时,150与200 m M Na Cl处理幼苗出现死亡植株,100 m M Na Cl处理组酸枣幼苗能维持一定的生长。(2)盐胁迫下菌根共生酸枣光合作用和抗氧化酶活力显著增加。在100 m M和150m M Na Cl条件下,接种AMF通过提高酸枣植株气孔导度(Cond)、增加PSII反应中心最大化学量子产量(Fv/Fm)并降低非光化学淬灭系数(NPQ),提高了叶片的光合能力。AMF还提高叶中抗氧化酶SOD、CAT、POD的活力,降低叶中的MDA含量,减少了盐胁迫下叶片的损伤程度;在根中抗氧化能力增强主要与POD、CAT的活性提高有关。(3)盐胁迫下,菌根共生通过调控元素吸收和转运,提高酸枣的营养水平和细胞稳态。接种AMF的酸枣组织中P、K、Na和Ca元素的含量高于未接种处理,K/Na值显著提高;100 m M Na Cl胁迫条件下,AM100叶中的K/Na较NM100显著提高。非损伤探测技术测定根尖的Na+流速发现,根尖200-800μm为离子吸收和外排的敏感区域,在非盐胁迫下,菌根共生植株会通过减少Na+外流以及增强H+、Ca2+外流和K+内流流速,调控根系对离子的吸收和转运,盐胁迫后,菌根共生植株通过增强Na+、H+外排以及减少K+外排,维持根的离子稳态。(4)通过转录组分析,盐胁迫下接种AMF与未接种处理(GT1-T1)在叶和根中分别调控差异表达基因814和1028个,这些DEGs在GO注释中主要富集在碳水化合物代谢、水解酶活性、离子跨膜转运蛋白活性、脂质代谢过程、转录调节活性、氧化还原酶活性等条目中,接种AMF通过影响酸枣的能量代谢离子吸收、转运及转录调节活性相关基因的激活,从而响应盐胁迫;盐胁迫下,菌根共生中AP2/ERF、WRKY和MYB三个主要家族基因表达受到了显著调控;在IAA的生物合成通路中,菌根共生主要通过提高IPA与IAOx途径相关基因表达水平,促进IAA的生物合成;此外,菌根共生也调控与植物抗性相关的JA和ABA的生物合成通路的基因表达,提高了盐胁迫后激素的内源水平,提高植物耐盐性。(5)盐胁迫下,菌根共生调控编码离子转运和通道蛋白的基因表达。盐胁迫后,菌根共生通过调控Zj NHX、Zj ATPase、Zj ATPase、Zj SKOR基因表达,调控H+外排和K+的外排;对P转运蛋白基因进行筛选后鉴定出7个PHT1基因家族成员;在接种植株中,不同盐胁迫时间下会选择性诱导Zj PHT1.5、Zj PHT 1.6、Zj PHT 1.7上调表达,调控P转运,而Zj PHT1.3和Zj PHT1.11表现出与接种AMF相关的特异表达模式。综上所述,盐胁迫下,酸枣幼苗能正常生长的Na Cl浓度阈值为100 m M;在生理水平上,菌根共生主要通过通过提高酸枣的光合作用、抗氧化酶活力内源激素含量以及增加叶中的营养水平和减少根系K+流失,提高植物的营养水平和维持离子稳态,使酸枣获得系统抗性;在转录水平上,菌根共生通过调控碳水化合物代谢、信号转导、离子跨膜转运和转录调节活性等基因的表达响应盐胁迫。
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