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目的通过测定不同程度支气管哮喘患者急性发作期、临床缓解期血浆和痰上清液中HNP1-3、IL-8的表达水平及外周血中性粒细胞凋亡率;观察HNP1-3在不同支气管哮喘病情严重程度以及分期的表达情况及与IL-8的表达、中性粒细胞凋亡情况的相互关系;探讨HNP1-3在支气管哮喘发病机制中的作用。方法2011年6月至2012年12月收集60例支气管哮喘急性发作期患者,轻度(A1组)19例、中度(A2组)23例、重度(A3组)18例,A1组经治疗后达临床缓解期患者(R1组)7例、A2组经治疗后达临床缓解期患者(R2组)11例、A3组经治疗后达临床缓解期患者(R3组)10例及20例健康自愿者(C组)的外周静脉血和痰,离心分离出血浆和痰上清液,用ELISA法检测其HNP1-3和IL-8表达水平;同时用FICOL分离法分离出外周静脉血中性粒细胞,用RT-PCR和Western blot方法检测中性粒细胞中HNP1-3mRNA及Caspase-3蛋白表达情况,流式细胞术检测中性粒细胞凋亡率。结果1.各组哮喘患者血浆HNP1-3的表达支气管哮喘急性发作期患者外周静脉血浆中HNP1-3的表达比健康对照者增高,其中轻度组HNP1-3的表达较健康对照组稍有增高,但差异无显著性(P>0.05);中度组和重度组HNP1-3的表达较健康对照组明显增高(P<0.01);中度组与重度组之间比较差异无显著性(P>0.05);临床缓解期较急性发作期HNP1-3的表达降低(P<0.01)。2.各组哮喘患者血浆IL-8的表达支气管哮喘急性发作期患者外周静脉血浆中IL-8的表达随病情严重程度增加而增高,临床缓解期IL-8的表达较急性发作期降低(P<0.05)。3.各组哮喘患者细胞分类计数支气管哮喘急性发作期患者外周静脉血和痰中性粒细胞比例随病情严重程度增高而增加,临床缓解期较急性发作期中性细胞比例降低(P<0.05)。4.各组哮喘患者外周血中性粒细胞HNP1-3mRNA的表达HNP1-3mRNA的表达在急性发作期组较健康对照组均有增高,其中轻度组与健康对照组比较无明显增高(P>0.05),中度、重度组较健康对照组及轻度组均有明显增高(P<0.01),中度组与重度组比较差异无显著性(P>0.05),临床缓解期较急性发作期HNP1-3mRNA表达降低(P<0.01)。5.各组哮喘患者外周静脉血中性粒细胞Caspase-3蛋白表达轻度组与健康对照组比较差异无显著性(P>0.05),中度、重度组与健康对照组、轻度组比较均明显降低(P<0.01),中度组与重度组比较差异无显著性(P>0.05),临床缓解期较急性发作期增加(P<0.05)。6.各组哮喘患者外周静脉血中性粒细胞凋亡率轻度组较健康对照组降低(P<0.01),中度组较健康对照组、轻度组均降低(P<0.01),重度组较健康对照组、轻度组及中度组降低(P<0.01),临床缓解期较急性发作期中性粒细胞凋亡率增加(P<0.01)。7.各组哮喘患者痰上清液HNP1-3的表达轻度组较健康对照组增高(P<0.01),中度、重度组较健康对照组、轻度组均增高(P<0.01),中度组与重度组比较差异无显著性(P>0.05),临床缓解期组较急性发作期组HNP1-3的表达降低(P<0.01)。8.各组哮喘患者痰上清液中IL-8的表达轻度组与健康对照组比较差异无显著性(P>0.05),中度组较健康对照组、轻度组均增高(P<0.01),重度组较健康对照组及轻度组均增高(P<0.01)而与中度组比较差异无显著性(P>0.05),临床缓解期较急性发作期HNP1-3的表达降低(P<0.05)。9.相关性分析痰上清液中HNP1-3表达水平与IL-8、中性粒细胞比例呈正相关(r值分别为0.782,0.796,P均<0.01),血浆中HNP1-3表达水平与FEV1、FEV1占预计值%和PEF呈负相关(r值分别为-0.689,-0.603,-0.643,P均<0.01),痰上清液中HNP1-3水平与FEV1、FEV1占预计值%、PEF和PEF占预计值%呈负相关(r值分别为-0.713,-0.818,-0.638,-0.720,P均<0.01)。结论1. HNP1-3参与支气管哮喘急性发作期的炎症过程,该过程与中性粒细胞比例及炎症因子IL-8有关,可能是哮喘发病的重要机制之一。2.HNP1-3的表达水平反应支气管哮喘急性发作期病情严重程度。3.血和痰中HNP1-3表达水平可望作为支气管哮喘急性发作期病情严重程度的指标。