细菌挥发性物质诱导捕食线虫真菌捕食器官形成的初步研究

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研究表明细菌能产生挥发性物质(VOCs)诱导少孢节从孢(Arthrobotrysoligospora)产生捕食器官(三维菌网),本论文对筛选获得具有诱导活性的细菌进行了16S rRNA鉴定;利用气相色谱-质谱联用仪(GC/MS)对细菌挥发性代谢产物进行鉴定,同时利用靛酚蓝分光光度法对细菌挥发性物质中氨气的含量进行测定;将鉴定出的挥发性化合物进行诱导活性的检测,并进行对不同捕食线虫真菌不同捕食器官诱导活性的检测。取得的主要研究结果如下:  1.筛选获得41株具有诱导少孢节丛孢(A.oligospora)产生三维菌网的细菌。其中菌株CD98、CD97、CD212、CD204、CD2301、CD23、CD24、CD261、CD164B、CD29、CD253、CD126、CD11-2、CD9、JS6、WT1、YJ001和GMX6的诱导活性非常强(>80%)。  2.对41株细菌进行16S rRNA鉴定,结果表明这些细菌分布在18个不同的属种,包括变形杆菌属(Proteus)、寡养单胞菌属(Stenotrophomonas)、蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)、粪产碱杆菌(Alcaligenes faecalis)、绿脓杆菌(Pseudomonasaeruginosa)、金黄杆菌属(Chryseobacterium)、蒙氏假单胞菌(Pseudomonas monteilii)、根瘤菌属(Rhizobium)、不解糖假苍白杆菌(Pseudochrobactrum saccharolyticum)、赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus)、雷氏普罗威登斯菌(Providencia rettgeri)、葡萄球菌(Staphylococcus saprophyticus)、大洋芽孢杆菌属(Oceanobacillus)、表皮短杆菌(Brevibacterium epidermidis)、产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes)、无色杆菌属(Achromobacter)、大肠杆菌(Escherichia coli)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。通过系统进化树分析,所检测的具有诱导少孢节丛孢(A.oligospora)产捕食器官的细菌主要分布在三个进化分支上。  3.通过GC/MS以及靛酚蓝分光光度法鉴定细菌产生的挥发性物质,同时对鉴定出的挥发性化合物进行诱导活性的检测。结果表明NH3对少孢节丛孢(A.oligospora)具有较强的诱导活性,此外,2-戊酮、2-庚酮和硫代丁酸甲酯存在不稳定且较弱的诱导活性。  4.氨气的普遍性诱导结果表明,在选取的35株真菌中,能够被氨气诱导形成捕食器官的有12株真菌,其中能被诱导产生三维菌网的有节丛孢属(Arthrobotrysguizhouensis YMF1.00014、Arthrobotrys vermicola YMR1.1489、Arthrobotrysmicroscaphoides YMF1.0028、Arthrobotrys oligospora YMF1.01883、Arthrobotrysconoide YMF1.01879、 Arthrobotrys oviformis YMF1.03316和Arthrobotrysoligospora YMF1.588)以及隔指孢属真菌Dactylellayunnanensis YMF1.3531;能被诱导产黏性球的有隔指孢属真菌Dactylellina leptospora YMF1.01460和Dactylellina phymatopaga YMF1.01474;能产黏性分支的是隔指孢属真菌Dactylellina cionopaga YMF1.01472;能产收缩环的是小掘氏孢属真菌Drechslerellabrochopaga YMF1.01829。
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