【摘 要】
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目的:研究辐射诱导的多倍体He La细胞的增殖、凋亡、迁移及侵袭的生物学特性,以探讨其在宫颈癌放疗后复发中的潜在作用。研究方法:使用6 MV-X射线分别以7 Gy、14 Gy的剂量照射He La细胞,继续孵育3 d后收集细胞并标记为7 Gy组和14 Gy组,将未经辐射的细胞作为对照组。光镜下观察细胞形态,流式细胞术检测细胞DNA倍性,二苯基四氮唑溴盐（MTT）法检测细胞增殖,Annexin-V/P
【基金项目】
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辽宁省科学技术计划项目（NO.2019JH8/10300082）；
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目的:研究辐射诱导的多倍体He La细胞的增殖、凋亡、迁移及侵袭的生物学特性,以探讨其在宫颈癌放疗后复发中的潜在作用。研究方法:使用6 MV-X射线分别以7 Gy、14 Gy的剂量照射He La细胞,继续孵育3 d后收集细胞并标记为7 Gy组和14 Gy组,将未经辐射的细胞作为对照组。光镜下观察细胞形态,流式细胞术检测细胞DNA倍性,二苯基四氮唑溴盐（MTT）法检测细胞增殖,Annexin-V/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell实验检测细胞迁移侵袭的能力。基于癌症蛋白质组图谱（TCPA）采用Spearsman秩相关检验分析宫颈癌中与P-STAT3（Tyr 705）表达具有显著相关性的分子,运用R包“cluster Profiler”将相关分子进行GO及KEGG富集分析。蛋白质免疫印迹法检测细胞P-STAT3（Tyr 705）及下游抗凋亡相关蛋白表达。结果:7 Gy组和14 Gy组细胞体积明显增大,多倍体细胞亚群（DNA含量＞4 N）比例均明显高于对照组,且随着放疗剂量的增加,14 Gy组多倍体细胞亚群比例显著高于7 Gy组,差异均具有统计学意义（均P＜0.001）。与对照组和7 Gy组相比,14 Gy组多倍体He La细胞增殖受到抑制（均P＜0.05）。对照组细胞、7 Gy和14 Gy组多倍体He La细胞的凋亡率差异无统计学意义（P＞0.05）。7 Gy和14 Gy组多倍体He La细胞的迁移与侵袭能力与对照组相比显著下降,14 Gy组多倍体He La细胞的迁移与侵袭能力显著低于7 Gy组（均P＜0.001）。在宫颈癌中与P-STAT3（Tyr 705）表达相关的分子主要定位于染色体、端粒及纺锤体,参与HPV感染、PI3K-Akt、m TOR、Erb B等致癌途径。辐射诱导的多倍体He La细胞P-STAT3（Tyr 705）、Bcl-2的表达水平均高于对照组,且随着辐射剂量的增加表达水平进一步增高;与对照组相比,14 Gy组多倍体He La细胞Survivin、Mcl-1表达水平均上调（均P＜0.05）。Bcl-x L在3组间的表达差异无统计学意义（P＞0.05）。结论:辐射诱导He La细胞发生多倍体化,其增殖、迁移及侵袭能力降低,凋亡率无显著变化,但其STAT3分子的磷酸化激活可能参与了多倍体形成及宫颈癌的发生发展,下游抗凋亡相关蛋白表达上调,有利于多倍体肿瘤细胞成为宫颈癌放疗后复发的潜在危险因素。
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