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第一部分载Dox的Ta@Ca Alg自显影药物洗脱微球的表征及细胞实验目的:表征微球的粒径大小、形态与显影性,细胞实验研究微球生物相容性。材料与方法:在Ta@Ca Alg微球载Dox前后,分别使用电子显微镜与荧光显微镜检测粒径与形态学改变,应用电子计算机断层扫描(Computed Tomography,CT)检测X线穿透能力,应用BEL-7402肝癌细胞行细胞毒性实验,使用红细胞行溶血性实验。结果:Ta@Ca Alg、Ta&Dox@Ca Alg粒径分别为259±5μm与257±4μm,大小、形态无明显差异;Ta@Ca Alg微球、碘克沙醇、Ta&Dox@Ca Alg三者的CT值分别为3070.0±0.6HU、3071.0±0.0HU、3070.8±0.5HU,无统计学差异(P>0.05)。Ta@Ca Alg、Ta&Dox@Ca Alg细胞毒性及致溶血性均在可接受范围内。结论:Ta@Ca Alg微球载Dox后粒径、形态无明显改变,显影性与通用的造影剂无差异,生物相容性好。第二部分载Dox的Ta@Ca Alg微球的体内药物释放特性研究目的:评估Ta@Ca Alg微球所载Dox在动物肝癌模型体内的释放过程;材料与方法:(1)建立16只VX2兔肝癌种植模型,经肝脏CT检查证实造模成功;(2)每1ml微球载50mg Dox,以Ta@Ca Alg微球载Dox行TACE治疗,每只瘤兔使用0.05ml微球;(3)于术后5分钟、3、6、12、24、72小时各取4只瘤兔从耳中动脉取外周血,离心取血浆;于术后6、12、24、72小时分别处死4只瘤兔,取肝脏、脾脏、肺、心脏,-80℃保存;(4)使用高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)检测血浆、肿瘤组织Dox浓度;使用小动物成像仪显示各器官的荧光分布。结果:(1)血浆检测显示Dox在5分钟达到峰值,3小时后不可测;(2)肿瘤组织Dox在3天内呈逐步上升趋势,Dox主要分布于肝脏肿瘤组织。结论:Ta@Ca Alg微球载Dox行TACE治疗能够实现肿瘤组织至少3天内局部高浓度释放,而外周血浆及脏器Dox较低。第三部分载Dox的Ta@Ca Alg微球的体内药效学研究目的:证实Ta@Ca Alg微球用于TACE治疗时具有栓塞、化疗、自显影三重作用;材料与方法:(1)建立15只VX2兔肝癌种植模型,经肝脏CT检查证实造模成功,随机分为3组,每组5只;(2)分别给予以下处理:A组(Ta@Ca Alg微球栓塞组)、B组(Ta&Dox@Ca Alg微球栓塞组),C组(生理盐水假栓塞组);(3)分别于术前1天、术后7天行肝脏增强CT检查,测量肿瘤术前体积V1与术后体积V2,并计算各组肿瘤体积增长率(V2/V1×100%)。瘤兔术后7天CT检查后处死取肿瘤组织,做成石蜡切片,并行HE染色。结果:15只瘤兔均成功进行了介入治疗,栓塞过程顺利,微球显影清晰,能精确显示微球的位置。术后7天复查结果,A、B两组肿瘤生长率明显小于生理盐水组,且载药微球组对肿瘤抑制效果优于空白微球组;HE染色结果显示A、B两组可见大片凝固性坏死区,且B相较于A组的残存肿瘤细胞更少。结论:Ta@Ca Alg微球栓塞过程中显影性好,使用方便,该微球载药能够相对于单纯栓塞能够更好抑制肿瘤生长。