原发性肝癌(primary hepatic carcinoma)是当前危害人类生命与健康的重要疾病之一，尤其我国是病毒性肝炎高发国家，以肝炎为背景的肝细胞肝癌近年来发病率有增高趋势。原发性肝癌根治性切除术的术后高复发率和术后转移仍然是影响肝癌患者预后的重要因素。目前临床应用的各种化疗治疗方案效果不佳，总有效率仅10％左右，且毒副作用极大。因此，寻找有效的防治肝癌术后复发和转移的新方法仍然是国内外肝胆外科界的研究热点和重点课题。离体肝切除自体肝移植术解决了常规手术不能切除的特殊部位肿瘤的问题。肝脏离体手术技术最早在1988年由德国汉诺威医学院Pichlmayer报道，后来在欧洲相继有少量个案报道。我国首例离体肝切除、自体肝脏移植术于2005年10月在新疆医学院附属医院成功完成。我科目前已开展了全国数量最多的38例离体肝切除术，并且患者生存时间最长接近4年。肝癌常规手术切除后5年生存率约为30%，并且5年复发率较高，达到60%-80%。目前我科行离体肝切除术的患者基本都是常规手术无法完整切除或有血管侵犯的情况，术后患者生存率、复发率与常规肝癌切除相比并没有明显差异，但是经过长期随访发现部分患者的生存时间较常规肝癌切除术长。此外，通过长期临床观察发现，在离体肝切除术后，绝大多数患者的肝功能恢复情况要好于常规肝门阻断患者。离体肝切除术中肝脏的低温冷冻缺血保存是区别于常规手术单纯的肝门阻断的要点之一。近年来，国内外学者探讨低温对心、脑缺血再灌注损伤的影响，取得大量的研究成果。许多研究证实：低温能多环节、多途径减轻缺血再灌注损伤，具有显著的器官保护作用。有研究在发现，低温可明显抑制脑缺血再灌注后氧自由基的产生，保护抗氧化反应酶活性。另有研究者在冠状动脉手术时发现，低温组IL-8表达明显降低，推测可能是低温抑制了IL-8的表达，从而起到了对心脏的保护作用。此外，还有研究者在鼠肠缺血再灌注实验中发现，低温预处理组与缺血预处理组比较，小肠组织Bcl-2蛋白表达光密度值增高，Bax蛋白表达光密度值降低，Bcl-2/Bax光密度比值明显增高，表明低温能增强缺血预处理的保护作用。目前关于低温用于缺血再灌注损伤中肝脏保护的研究还比较少。那么在离体肝切除术中是否由于低温冷冻缺血保存保护了肝细胞的生物学特性从而影响了病人的预后，这是我们需要进一步研究的问题。因此，本课题首先在体外使用L02肝细胞，通过UW液处理模拟缺血再灌注损伤模型，观察其对细胞活力，氧化损伤标志物LDH、MDA表达和SOD酶活力，细胞内ROS生成以及细胞凋亡等的影响。并进一步观察低温冷冻对UW液模拟的缺血再灌注模型中细胞活力、氧化损伤标志物LDH、MDA表达和SOD酶活力，细胞凋亡等的影响。本实验的主要实验结果和结论如下：(1)UW液处理模拟缺血再灌注损伤可明显诱导L02肝细胞功能障碍，主要表现为显著抑制L02细胞活力、促进细胞凋亡发生、增加脂质过氧化、降低细胞抗氧化能力以及增加细胞内ROS水平。(2)低温冷冻能明显抑制UW液模拟的缺血再灌注模型中L02细胞功能障碍，主要表现为显著增加L02细胞活力、抑制细胞凋亡、减少脂质过氧化、提高细胞抗氧化能力、减少细胞内ROS生成以及促进抗凋亡基因bcl-2的蛋白表达、抑制促凋亡基因bax的蛋白表达。综上所述，低温冷冻对UW液模拟的缺血再灌注模型中L02细胞氧化应激损伤具有明显的抑制作用，并可能主要通过作用于bcl-2/bax抑制细胞凋亡的发生。离体肝切除术已经成为治疗肝癌的重要手术方式之一，而低温冷冻对手术预后的影响也已成为该领域的研究热点之一，本课题的研究结果为指导我们临床手术中缺血冷保存时间的控制提供了重要理论依据。