【摘 要】
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乳腺癌已位居女性肿瘤死亡的首位。乳腺癌的发生与人体内雌激素的增加,孕激素的减少密切相关,性激素的代谢紊乱促进了某些乳腺癌的生长,但其确切发病机制目前尚不清楚。Kalli
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乳腺癌已位居女性肿瘤死亡的首位。乳腺癌的发生与人体内雌激素的增加,孕激素的减少密切相关,性激素的代谢紊乱促进了某些乳腺癌的生长,但其确切发病机制目前尚不清楚。Kallikrein是一类新发现的性激素依赖性肿瘤标记家族,KLK6是其基因家族的15个成员之一,编码丝氨酸蛋白酶(hK6),与性激素依赖性器官肿瘤—乳腺癌的发病有关,但参与的机制尚不清楚。为此,该课题对雌激素—KLK6基因—乳腺癌细胞的生物学性状三者之间的关系进行了研究。观察雌激素对KLK6表达水平的调节,以及对MCF-7细胞株生物学特性的影响,证实KLK6基因的作用及雌激素促乳腺癌细胞恶性变是否通过KLK6参与。 该课题分五部分: 1、建立KLK6 mRNA实时荧光定量检测方法。 2、定量检测KLK6 mRNA在33例不同病程乳腺癌患者的癌组织及25例正常组织中的表达水平以及统计分析与肿瘤有无转移、雌激素受体、孕激素受体、癌基因CerbB-2等临床病理特征的关系,探讨其临床意义。 3、对雌激素受体阳性ER(+)人乳腺癌细胞株MCF-7进行雌激素调节试验,以探讨雌激素和抗雌激素药物三苯氧胺对MCF-7 KLK6基因表达水平及对细胞生物学特性的影响。 4、应用RNAi技术,以乳腺癌细胞株MCF-7为研究对象,探讨KLK6基因被干扰沉默后MCF-7细胞形态、增殖生长周期及细胞凋亡的变化。 5、应用MCF-7乳腺癌细胞株建立裸鼠乳腺癌动物模型,体外合成KLK6 siRNA并构建其表达载体,瘤体注射siRNA或载体,探讨siRNA对乳腺癌荷瘤鼠实体瘤细胞KLK6基因的干扰效果及其对瘤体细胞生物学特性的影响。 研究结果:
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