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外排作用是绿脓杆菌对许多结构功能迥异的药物具有先天和后天耐受的最重要机制。在绿脓杆菌的诸多外排泵中，MexAB-OprM是底物谱最广，外排作用最强的外排泵。四环素、氯霉素、喹诺酮类抗生素、新生霉素、大环内酯类抗生素、β-内酰胺类抗生素和β-内酰胺酶抑制剂等许多广泛使用的抗生素都是MexAB-OprM外排泵的外排底物。本研究通过分子生物学方法，以绿脓杆菌标准菌株PA01基因组为模板，克隆得到mexA-mexB-oprM操纵子，构建了克隆载体pUC18-mexAB-oprM；接着进一步将pUC18-mexAB-oprM上的mexA-mexB-oprM操纵子，克隆进质粒pAK1900中，得到表达载体pAK1900-mexAB-oprM；并通过电击转移的方法，将质粒成功转化至敲除了mexRAB-oprM、mexXY、mexCD基因的绿脓杆菌N150中，获得了有效表达绿脓杆菌MexAB-OprM外排泵的基因工程菌XY229。对XY229各种抗生素的最小抑菌浓度进行了测定，结果表明：XY229对多种不同作用机制抗生素的MIC值，明显高于其宿主菌——N150。利用XY229作为检定菌，建立了以绿脓杆菌MexAB-OprM外排泵为靶点的药物筛选模型，并应用该模型对1200个化合物样品进行了筛选，获得101个阳性化合物，阳性率为8.42％。