目的：构建Survivin反义RNA/HSP70双基因表达载体，为后期转染肿瘤细胞，抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡以及激发机体有效的特异性抗肿瘤免疫应答提供重要的实验材料。 方法 应用RT-PCR从Jurkat细胞中获得Survivin cDNA片段，反向插人pIRES2-DsRed2质粒载体中，经酶切和测序鉴定所构建的Survivin反义RNA表达载体是否成功；应用RT-PCR从HepG2细胞中获得的HSP70 cDNA片段，定向插入到plRES2-DsRed2质粒载体中；经菌落PCR、酶切和测序鉴定所构建的HSP70表达载体是否正确。 结果 经酶切和测序鉴定证明Survivin反义tinA表达载体已成功构建；经菌落PCR、限制性酶切和测序鉴定证明HSP70表达载体已成功构建。 结论 本实验已成功构建了Survivin反义RN/HSP70双基因表达载体，为进一步研究提供了实验基础。