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目的:探讨相关凝血因子对蛋白酶激活受体2(protease-activatedreceptors 2,PAR2)的激活作用;初步探索TF-Ⅶa激活PAR2而促进结肠癌细胞株SW620细胞增殖与迁移的作用机制及相关信号转导通路。方法:以PAR2激动剂(PAR2-AP)作为激活PAR2的参照,利用不同浓度及不同组合的凝血因子Ⅶa、Ⅹ、Ⅱa及抗组织因子(tissuefactor,TF)、抗PAR2抗体等处理SW620细胞,采用ELISA法检测细胞培养上清白细胞介素8(IL-8)水平,从而评价各种凝血因子对PAR2的激活作用;以定量PCR(Q-PCR)重点检测因子Ⅶa对细胞表达IL-8、TF及半胱氨酸蛋白酶7(caspase-7)mRNA水平的影响,同时以Ⅹa生成法检测因子Ⅶa对细胞TF活性表达的影响,从而分析TF-Ⅶa促进SW620增殖与迁移的作用机制;进一步采用Western-blotting分析TF-Ⅶa激活PAR2后细胞丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)磷酸化的改变,初步探讨PAR2活化后涉及的相关信号转导通路。结果:(1)在因子Ⅹ(100 nM)存在条件下,血浆浓度(100 pM)的凝血因子Ⅶa能够促进SW620细胞IL-8的表达,单克隆抗TF或抗PAR2抗体均可抑制TF-Ⅶa-Ⅹ的作用;(2)较高浓度(10 nM)的因子Ⅶa单独作用即可上调SW620细胞IL-8分泌;(3)凝血酶(即因子Ⅱa)轻微下调SW620细胞IL-8表达,Himdin、抗PAR1或抗PAR2抗体均可阻断Ⅱa作用;(4)因子Ⅶa(10 nM)除上调SW620细胞IL-8蛋白表达外,同时也上调细胞IL-8与TF mRNA表达及TF活性,下调细胞caspase-7mRNA表达及p-p38 MAPK水平。单克隆抗TF或抗PAR2抗体均可抑制Ⅶa的作用。结论:TF-Ⅶa及TF-Ⅶa-Ⅹa复合物,而非Ⅱa,可活化结肠癌细胞株SW620细胞表面受体PAR2。TF-Ⅶa通过活化PAR2上调SW620细胞IL-8、TF表达、下调caspase-7表达,从而促进细胞增殖与迁移能力,p38 MAPK在此过程中起负性调节作用。