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研究背景肾缺血再灌注损伤（Renal ischemia-reperfusion injury RI/RI）是一个发生在许多肾脏疾病及肾移植方面的普遍问题，且肾缺血后血流再灌注会对肾脏产生更严重的损害，特别是在肾移植中，RI/RI是一个复杂的多因素参与的过程，能影响移植肾的功能，造成明显的肾功能损害、移植肾功能延迟恢复（DGF），甚至移植肾失功。其不仅影响早期移植肾功能，而且与远期移植效果息息相关[1-2]，尽管多年来有关RI/RI的研究颇多，然而其确切的病理生理机制并没有明确，尚未找到理想的调控靶点。微小RNA （microRNA，简称miR）是在真核生物中发现的一类内源性的具有调控功能的非编码的单链小RNA，其大小长约20~25个核苷酸。它们与其靶基因mRNA3′端非翻译区（3′-URT）互补配对，通过阻遏靶基因翻译过程或降解靶基因，从而在翻译水平调节靶基因的表达，阻止蛋白质合成。这一调控作用对于研究疾病发生的病理生理过程及其作用机制起着至关重要的作用。近年来，miR在组织缺血再灌注损伤中的研究得到广泛关注，有报道miR在心肌、肝脏、大脑等组织缺血再灌注损伤方面的研究较多[20-22]，然而在肾脏缺血再灌注方面的研究较少，特别是miR-24在心肌缺血方面的研究较为深入，且证实miR-24是通过靶基因GATA-2而发挥作用[16]。而其在肾组织缺血再灌注损伤方面的研究尚未见报道，本文从miR的角度出发，研究miR-24及靶基因GATA-2在肾缺血再灌注损伤中的动态表达，探讨miR-24在肾缺血再灌注损伤中的调控作用及其机制，为进一步研究其在肾缺血再灌注损伤病理生理调控过程的作用及其机制奠定基础。目的：研究miR-24及靶基因GATA-2在肾脏缺血再灌注损伤中的动态表达，探讨miR-24在肾缺血再灌注损伤中的调控作用及其机制。方法：建立大鼠RI/RI模型，分别于术前及肾脏血流再灌注后4h、24h、48h、72h采血及收集肾脏标本，检测肾功能，并且行HE染色观察肾脏组织病理学改变，采用实时荧光定量PCR（Real-time PCR）方法检测miR-24及其靶基因GATA-2在各组缺血受损肾脏中的mRNA表达水平。采用免疫组织化学染色方法观察GATA-2在各组缺血受损肾脏中的的蛋白表达水平。结果：1、RI/RI模型成功：①：肾功能测定：假手术组（sham）大鼠肾功能变化与正常组（N）比较无差异（P>0.05），各I/R组中大鼠肾功能发生明显改变，以I/R24h组中大鼠肾功能变化（Cr:234±50.52umol/L）最为显著，各I/R与sham组及N组比较均有显著统计学意义（P<0.01）；②：HE染色：各I/R组大鼠肾脏呈不同程度的病理改变，以I/R24h组中病理改变最严重，与Sham组及N组显著区别。2、 Real-time PCR检测显示：miR-24在肾I/R损伤后4h、24h、48h及72h表达情况呈现出不同程度的上调趋势，sham组miR-24表达上调倍数为1.31±0.49，与N组（1.11±0.27）相比无统计学差异（P>0.05），其I/R4h组、I/R24h组、I/R48h组及I/R72h组miR-24表达上调倍数分别为3.13±0.88、1.76±0.17、3.13±0.97及6.27±0.83，其中以72h表达上调最为显著，I/R4h组、I/R48h组与Sham组比均有统计学意义（P<0.05），而I/R24h组、I/R72h组与Sham组比均有显著统计学意义（P<0.01）。3、 Real-time PCR检测显示： GATA-2在肾I/R损伤后4h、24h、48h及72h表达情况呈现出不同程度的下调趋势，其sham组GATA-2表达下调倍数为0.91±0.18，与N组（0.97±0.20）相比无统计学差异（P>0.05），其I/R4h组、I/R24h组、I/R48h组及I/R72h组GATA-2表达下调倍数分别为0.54±0.10、0.65±0.13、0.30±0.08及0.21±0.11，其中以72h表达下调最为显著，各I/R组与Sham组相比均有显著统计学意义（P<0.01）。4、免疫组化检测显示：肾I/R损伤后GATA-2主要表达于肾小管上皮细胞胞核内（胞核呈黄褐色），但肾小球内皮细胞胞核也可见少量表达。其蛋白表达水平呈现下调趋势， Sham组与N组相比，GATA-2的表达水平无统计学差异（P>0.05），各I/R组中GATA-2表达水平均低于N组及Sham组，其中以I/R72h组表达下降最为明显，各I/R组与N组和sham组相比均有显著统计学意义（P<0.01）。结论：1、大鼠肾脏缺血再灌注损伤过程中miR-24的表达显著上调，其靶基GATA-2表达水平显著下调；2、大鼠肾脏缺血再灌注损伤后miR-24可能通过负向调节靶基因GATA-2下调，进而后者抑制VEGF及VEGF2的表达活性，从而参与肾脏修复过程中血管新生的调控过程。