为探讨钙结合蛋白D28k重组表达载体对老龄蛋鸡钙代谢和蛋壳质量的调控效应。试验首先制备和鉴定钙结合蛋白D28k真核表达载体(pCEP4-CaBP-D28k),而后选用70周齢新扬州鸡产蛋鸡36只,随机分为4组,每组3个重复,每个重复3只,研究不同日粮钙(3.5%和2.5%)水平条件下,经腿肌注射200μg鸡钙结合蛋白D28k基因质粒后对老龄蛋鸡血液中钙代谢相关因子、骨骼质量、养分表观代谢率、产蛋性能、蛋壳质量和微观构造的影响。试验结果表明,双酶切电泳和测序结果显示pCEP4-CaBP-D28k质粒制备成功;pCEP4-CaBP-D28k重组表达载体在蛋鸡体内获得了良好表达,0~14 d时表达量最高,随试验期延长表达效果逐渐减弱;0~14 d时:同等日粮钙水平条件下,pCEP4-CaBP-D28k质粒可显著减缓甲状旁腺素、促进降钙素分泌,并显著提高老龄蛋鸡血清中钙和碱性磷酸酶含量(P<0.05),但对雌二醇和血磷含量无显著影响;pCEP4- CaBP-D28k质粒可促进老龄蛋鸡骨钙代谢,显著提高胫骨指数和骨密度(P<0.05),不影响骨钙素分泌和骨磷沉积;pCEP4-CaBP-D28k质粒未对老龄蛋鸡产蛋性能和体重产生显著影响,但可显著提高其对钙的吸收利用率(P<0.05),促进蛋壳钙沉积,对蛋壳质量和超微构造也有明显改善作用。15~28 d时:注射pCEP4-CaBP-D28k质粒对老龄蛋鸡各项指标均无明显影响。综上所述,pCEP4-CaBP-D28k真核表达载体可促进老龄蛋鸡对钙的吸收代谢,利于骨钙沉积,对蛋壳质量和超微结构也有明显改善作用。饲喂低钙(2.5%)日粮时,注射pCEP4-CaBP-D28k质粒可显著改善老龄蛋鸡对钙的吸收利用率,促进蛋壳形成,并降低骨质疏松症发病风险。