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玉米是世界三大作物之一,也是我国主要的饲料和粮食作物。玉米穗腐病是一种严重影响玉米产量和品质的病害,其病原菌产生的伏马毒素严重影响玉米的食用性及可销售性。伏马毒素是一类主要由拟轮生镰孢(Fusarium verticillioides)和层出镰孢(Fproliferatum)产生的次生代谢产物,不仅能导致马的脑蛋白质软化病和猪的肺水肿等致命病症,还能增加人类食道癌的风险。基于伏马毒素的毒性,国际癌症研究署(IARC)已将FB1列为可能的致癌物质。本文明确了拟轮生镰孢在PDA培养基上生物合成伏马毒素的最适温度、水活度及培养时间,建立了PDA培养基中伏马毒素的测定方法;研究了不同温度和水活度对拟轮生镰孢GS-1菌株生长、伏马毒素产生的影响,不同药剂浓度处理对拟轮生镰孢GS-1菌株生长、伏马毒素产生的影响;研究了不同温度和水活度及药剂处理对FUM基因表达的影响。研究结果如下:明确了拟轮生镰孢在PDA中培养10d后,培养基中伏马毒素含量达到最大值,菌株所产生的伏马毒素绝大部分溶解在了培养基中,少部分残留在菌丝中。PDA培养基中伏马毒素以乙腈/水(V:V=3:1)为提取溶剂,然后60℃氮吹浓缩,高效液相色谱-柱后衍生法测定。初步明确了在温度和水活度影响拟轮生镰孢GS-1的生长及伏马毒素产生,其最适生长与产伏马毒素条件均为30℃和水活度为0.99。用不同浓度苯醚甲环唑和戊唑醇处理,两个药剂均随着浓度的增高,拟轮生镰孢GS-1的菌丝生长速率减慢,表明高浓度药剂对拟轮生镰孢的生长有强抑制作用,两者的ECso值表明,苯醚甲环唑对拟轮生镰孢的毒力低于戊唑醇。不同浓度的苯醚甲环唑和戊唑醇处理后,对拟轮生镰孢GS-1生物合成伏马毒素表现出抑制或刺激作用。不同浓度的苯醚甲环唑对拟轮生镰孢GS-1生物合成伏马毒素FB1和FB2均表现出一定的抑制作用。在苯醚甲环唑浓度为0.5μg/g~4μg/g范围内,随着药剂浓度的提高,菌株产生伏马毒素FB1和FB2的量呈减少趋势,抑制作用增强。但在苯醚甲环唑浓度为0.25μg/g时FB1和FB2的浓度却低于高浓度苯醚甲环唑处理,即该浓度对菌株产生伏马毒素的抑制能力高于其他供试浓度。在不同供试浓度戊唑醇处理后,除浓度为0.25μg/g处理,其他浓度的戊唑醇处理均对拟轮生镰孢GS-1生物合成伏马毒素表现出抑制作用。高浓度戊唑醇对拟轮生镰孢生物合成FB1和FB2具有较强的抑制作用。但在戊唑醇浓度为0.25μg/g时,拟轮生镰孢GS-1生物合成FB1和FB2的能力反而增强;对FUM基因表达结果分析表明,在不同温度和水活度条件下,基因FUM1、FUM21均在32℃和水活度为0.99时的表达量最低,而FUM19则在30℃和水活度为0.99时的表达量最低,并且与温度32℃和水活度0.99时的表达量接近。基因FUM1和FUM21在水活度0.95和32℃时表达量最大,分别是最低时表达量的近3倍和2倍多;而FUM19则在30℃和水活度为0.95时的表达量最高,是表达量最低时的2倍。在含不同浓度苯醚甲环唑培养条件下,基因FUM1在浓度为1μg/g时的表达量最低,基因FUM19和FUM21在浓度为4μg/g时的表达量最低,3个基因均在浓度为2μg/g时的表达量最高,FUM1分别是最低时表达量的1.5倍,而FUM19和FUM21则是最低表达量的2.0和1.8倍。在不同浓度戊唑醇培养条件下,基因FUM1和FUM19在浓度为0.5μg/g时的表达量最低,基因FUM21在浓度为0.25μg/g时的表达量最低。基因FUM1和FUM19在浓度为0.0625μg/g时的表达量最高,分别是最低时表达量的2.1和2.2倍,FUM21在浓度为1μg/g时的表达量最高,是最低时表达量的1.3倍。