支气管哮喘抗原提呈细胞表达与功能的研究

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目的 通过复制致敏小鼠和哮喘小鼠模型,观察支气管肺泡灌洗液(bronchalveolar lavage fluid,BALF)及腹腔冲洗液细胞学变化、腹腔巨噬细胞(macrophage,Mφ)功能变化及树突状细胞(dendritic cell,DC)的表达,探讨抗原对抗原提呈细胞(antigen presentation cell,APC)表达和功能的影响。 方法 用卵蛋白(ovalgumin,OVA)致敏小鼠,复制致敏小鼠模型,再以卵蛋白雾化吸入激发复制哮喘小鼠模型。在不同时间段收集肺泡灌洗液及腹腔冲洗液,进行细胞分类计数。采用流式细胞术测定腹腔Mφ主要组织相容性复合体(majorhistocompability complex,MHC)Ⅱ类抗原的表达。用ELISA法检测腹腔巨噬细胞培养上清液肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)及白三烯C4(leukotriene C4,LT-C4)的含量,流式细胞术测定脾单个核细胞DC表达。 结果 (1)致敏小鼠在致敏后2、5、7天,其腹腔Mφ(单位10~6/ml)、肺泡灌洗液细胞总数(单位10~5/ml)及肺Mφ(单位10~5/ml)分别为7.59±1.27、2.01±0.61、1.66±0.52:19.43±6.37、2.87±0.50、1.84±0.40;7.68±2.28、1.40±0.45、0.99±0.38。哮喘小鼠在诱导喘息后2、5、7天,其腹腔Mφ(单位10~6/ml)、BALF细胞总数(单位10~5/ml)及肺Mφ(单位10~5/ml)分别为16.62±5.56、3.63±0.79、2.55±0.72;15.34±4.22、5.03±0.56、2.99±0.42;17.10±2.04、5.05±0.75、3.15±0.37。正常对照组分别为3.13±0.74、0.65±0.17、0.54±0.18。致敏组、哮喘组与对照组比较有显著性差异。(2)致敏组、哮喘组及对照组小鼠表达MHC-Ia抗原的腹腔Mφ占Mφ总数的百分率分别为44.09%、59.28%、1.61%,致敏组、哮喘组与对照组相比明显增强(p<0.01),哮喘组与致敏组相比明显增强(p<0.05)。(3)致敏组、哮喘组及对照组小鼠脾脏DC占单个核细胞的百分率分别为16.18%、3.88%、1.84%,致敏组DC的百分率明显高于对照组(p<0.01),而哮喘组与对照组支气管哮喘抗原提呈细胞表达与功能的研究中文摘要相比差别无统计意义(P>0.05)。(4)致敏组、对照组小鼠腹腔巨噬细胞培养上清液翎F一a(ng/ml)分别为55.42士0.62、5.73士1.83,两组之间差异显著(p<0.01)。(5)致敏组、对照组小鼠腹腔巨噬细胞培养上清液LT-C4(ng/ml)分别为7.37士0.41、6.97士0.54,两组之间无统计学意义。 结论(1)致敏后小鼠腹腔M中数量表达明显增加,同时肺泡巨噬细胞数量表达明显增加。(2)致敏小鼠腹腔M中MHC一Ia抗原表达增加,具有明显抗原提呈能力,哮喘组小鼠腹腔M小的抗原提呈能力进一步增强。(3)巨噬细胞INF-a表达增加,未能增加1月几C4的表达。(4)致敏小鼠脾DC表达明显增加,但哮喘小鼠DC表达不明显。
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