针刺对EAE大鼠IL-17、NO影响的实验研究

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多发性硬化(MS)是一种T细胞介导的中枢神经系统内形成炎性脱髓鞘的慢性自身免疫性疾病。MS好发于青壮年,大多数MS患者因反复发作而致残,且由于目前对本病的治疗尚不满意,MS仍然被认为是一种难治的疾病。因此,找到安全有效地治疗MS的方法是当今医学界面临的重要问题。实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)是由于EAE具有与人类MS相似的临床、免疫、生化及病理特征,被认为是研究MS的理想动物模型,已用于研究MS治疗的作用机制和治疗法。针刺治疗有其整体性和双向性的作用特征,使机体免疫系统保持在相对平衡的状态下,这可能是针刺治疗MS的重要作用机制,但目前无论对MS针灸治疗的临床研究或EAE实验研究尚未被证实。因此,本实验在建立EAE模型的基础上,检测大鼠血清中IL-17和NO的水平通过探讨针刺对EAE的治疗作用及其可能的机制,探讨针刺治疗MS的有效性的科学依据。方法:将43只Wistar雌性大鼠随机分为空白对照组、EAE模型组、激素治疗组和针刺治疗组。取豚鼠脊髓匀浆与完全弗氏佐剂混匀制成油包水乳剂免疫诱导大鼠,以提高发病率,还施加百日咳杆菌在72h内腹腔注射,制备EAE模型,为其同样刺激,以给予大鼠0.9%的氯化钠溶液注射作为空白对照组。空白对照组和EAE模型组不予任何治疗,至造模后第30日取材。为证明针刺治疗的有效性,治疗方法采用激素治疗和针刺治疗而进行其疗效对比,激素治疗组在造模后第10日给予大鼠以每日一次30mg/kg的剂量尾静脉注射甲泼尼龙琥珀酸钠,连续治疗3日。接着造模后第13日开始,每日同一时间给予经胃灌注每次3m1的醋酸泼尼松悬浊液,至造模后第30日取材。针刺治疗组从造模后第10日开始针刺百会穴、双侧肾俞穴和足三里穴,至造模后第30日取材。每日观察记录大鼠的发病情况、体重变化和按Kono等提出的5分法来测定神经功能评分。取材以断头法取大鼠的血,经离心而取上清后,用ELISA法测定大鼠血清IL-17的含量,且用硝酸还原法测定大鼠血清中NO的含量。结果:通过神经功能评分,表明其造模成功。在神经功能评分方面,两个治疗组(包括激素治疗组和针刺治疗组)大鼠与EAE模型组相比,其症状改善明显(P<0.05)。治疗后,两个治疗组的血清IL-17和NO的水平与EAE模型组相比明显下降(P<0.05)。但其激素治疗组和针刺治疗组之间统计上无显著性差异(P>0.05)。结论:在EAE模型中,细胞因子IL-17和NO与Thl/Th2及Th17免疫应答有密切关系。通过针刺治疗和激素治疗对EAE模型进行干预发现,在大鼠血清IL-17和NO的含量治疗后明显下降,由此可推测在缓解期使维持Th1/Th2及Th17/Treg的功能平衡,而达到机体免疫因子保持在相对正常范围的治疗目的,表明针刺治疗多发性硬化有着确切的效果。两个治疗组之间的疗效比较在统计上无明显差异则表明针刺治疗和激素治疗EAE具有同等的疗效,但由于激素治疗组大鼠有两例死亡,可说明针刺治疗具有比激素治疗更安全且无副作用的治疗优势。
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