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杂草是玉米生育早期的主要危害,而草甘膦是一种广泛应用的高效低毒芽后灭生性除草剂,筛选抗草甘膦突变体及选育抗草甘膦品系具有重要的意义。本试验通过理化诱变筛选与体细胞筛选相结合的方法进行玉米抗草甘膦突变体的筛选工作。 理化诱变筛选结果表明:经诱变处理的自交系112当代出现多种变异,物理诱变能明显降低株高和穗位,900ppm的草甘膦溶液是筛选突变体和防除杂草较为理想的喷洒浓度,通过筛选得到了抗草甘膦突变植株,但没有得到种子。 在体细胞筛选中,首先诱导幼胚产生愈伤组织,然后把经过扩繁的愈伤组织放入含有草甘膦的N6培养基中继代培养三次,筛选出抗性愈伤组织后再转入不含草甘膦的培养基中恢复培养三次,而后抗性愈伤组织分化成苗。体细胞筛选采用了等浓度筛选法和梯度筛选法。根据不同草甘膦浓度下愈伤组织的死亡率及Ⅱ型愈伤组织所占比例确定了筛选的起始浓度和最高浓度。等浓度筛选法设定的草甘膦筛选浓度为300ppm-300ppm-300ppm、400ppm-400ppm-400ppm、500ppm-500ppm-500ppm,梯度筛选法为150ppm-200ppm-300ppm、200ppm-300ppm-400ppm、300ppm-400ppm-400ppm。两种方法相比,梯度筛选法更有利于保持愈伤组织的胚性和幼苗分化。 将经过筛选并恢复培养三次得到的抗性愈伤组织和对照放于含有草甘膦的培养基上,初步确认了得到的愈伤组织对草甘膦具有一定抗性。对抗性愈伤组织和对照的再生苗进行田间喷洒草甘膦鉴定,对照再生苗全部死亡,抗性愈伤组织的再生苗3棵存活,其余死亡,存活的再生苗即是抗草甘膦突变体。 在成熟胚愈伤组织的诱导与继代试验中,以28个基因型的玉米成熟胚为试验材料,初步研究了培养基种类、基因型、消毒时间、切胚方式、变温处理、蔗糖质量浓度、酸水解酪蛋白质量浓度、2,4-D质量浓度等因素对愈伤组织诱导与继代的影响,结果表明:N6和MN两种培养基对愈伤组织的诱导无显著差异,但对愈伤组织的继代培养有较大影响,其余7个因素对愈伤组织的诱导与继代都有明显影响。最终选出了3个高培养力材料,确定了比较适合成熟胚愈伤组织诱导与继代的培养基。