知柏地黄汤对UU感染大鼠生精细胞凋亡因子Cyt-c、AIF影响实验研究

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[目的]通过观察知柏地黄汤对解脲支原体(UU)感染大鼠精液常规各项指标及生精细胞凋亡因子Cyt-c、AIF表达的影响,探讨UU感染导致不育症的病理机制及知柏地黄汤的干预作用。[方法]4~5月龄SPF级SD大鼠60只,随机抽取45只,经膀胱接种UU悬液,建立UU睾丸感染动物模型。剩余15只同步注射生理盐水作为正常对照组,于接种后的第7天取睾丸穿刺液运用培养法检测UU,判断造模成功否。造模成功后,UU感染模型大鼠再随机分成模型组、阿奇霉素组、知柏地黄汤组。知柏地黄汤组给药量为lg/kg· d(即1ml/d),阿奇霉素组给药量为0.105mg/kg· d(即1ml/d),正常组、模型组给予相同剂量的生理盐水。以上各组均灌胃给药,每日一次,连续给药21d。处死大鼠后取睾丸附睾组织,采用机械分离法分离精子细胞,应用彩色精子动态检测系统进行精子运动参数测定,检测各组UU培养结果,生精细胞凋亡率,采用ELISA方法检测生精细胞凋亡因子Cyt-c、AIF表达水平。[结果]与正常组相比,模型组大鼠A级精子、B级精子、直线速度、平均速度均明显降低,UU培养阳性率、生精细胞凋亡率明显升高,生精细胞凋亡因子Cyt-c. AIF表达水平差异均有统计学意义(p<0.01)。经治疗后,与模型组比较,中药组和西药组UU培养阳性率降低,比较有统计学意义(P<0.05),且中药组与西药组比较无统计学意义(P>0.05),A级精子、B级精子、直线速度、曲线速度、平均速度水平提高,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。中药组在提高A级精子、B级精子、曲线速度、平均速度方面效果优于西药组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。两组Cyt-c、AIF表达水平亦明显降低(P<0.01),但中药组与西药组比较无统计学意义(p>0.05)。[结论]1.知柏地黄汤能有效抑制UU的生长、繁殖,具有抗UU作用。1.UU感染可以导致大鼠生精细胞凋亡增加,从而反映精液质量的下降是由于UU感染使生精细胞凋亡过度导致,精液质量下降进一步导致不育症的发生。2.UU感染大鼠生精细胞Cyt-c、AIF表达水平增强,说明生精细胞凋亡因子Cyt-c、AIF的表达增强是促使细胞凋亡的重要因素,且细胞凋亡是多途径的。3.知柏地黄汤可以下调Cyt-c、 AIF的表达水平。说明知柏地黄汤治疗UU感染,提高精液质量的机制之一是通过调节依赖性Caspase途径细胞凋亡因子Cyt-c和非依赖性Caspase途径细胞凋亡因子AIF的表达,从而多途径抗细胞凋亡。
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