自被发现以来,由于对虾白斑综合症病毒(WSSV)的高传染性,高死亡率,此病毒成为了危害虾类养殖业的主要病原之一,并严重影响了对虾产业的发展。由于WSSV感染宿主的关键步骤之一是其极早期基因的转录与翻译,因此本文着重分析了 WSSV极早期基因wsv249启动子及其有关转录因子之间的联系。WSSV极早期基因wsv249编码了一种E3泛素连接酶,能够与对虾体内的泛素结合酶相互作用。本研究中,为了了解wsv249转录调节机制,将wsv249启动子序列以25 bp为单位截短,并分析其启动子活性。四个25 bp区域被认为是潜在的正向或逆向调控元件。值得注意的是,将启动子CRE元件(-275/-250)截去,启动子活性受到抑制而降低了 84.2%。CRE元件是环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREBs)和激活蛋白1(AP-1)的结合位点。为此,本文深入研究了对虾体内同源蛋白Lvc-Jun和LvCREB-3对wsv249启动子的调控作用。我们通过(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术在凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)体内发现了一种CREB同源蛋白LvCREB-3,并且LvCREB-3蛋白在鳃组织中分布最多,而在心脏中含量最少。通过WSSV感染实验,发现在病毒感染12-24小时之间,LvCREB-3基因表达量在对虾鳃组织中迅速上升。这一时间段刚好与WSSV病毒极早期基因的表达相对应。另外,Lvc-Jun能够上调wsv249启动子活性高达12.4倍。EMSA实验证明Lvc-Jun能够与启动子中CRE序列结合。双荧光素酶报告基因检测证明位于wsv249启动子序列中-212/-205bp位置的CRE位点而不是-256/-249bp位置的CRE位点,在启动子活性方面起关键作用。相反,对虾体内LvCREB-3蛋白并不能激活wsv249启动子活性。上述研究有助于了解WSSV病毒与宿主体内因子的相互关系,同时也能够帮助了解病毒感染初期,其极早期基因在宿主体内的转录调控,为将来病毒防治提供理论依据。