19个绣球属种质资源的SRAP分析

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绣球属(Hydrangea)是绣球科中最大的属。对绣球属的分类研究可以追溯到1867年,到目前为止,对绣球属的分类都是从形态学及表型性状上进行研究的,尚无人用分子标记技术对该属属下等级划分,种的归属,种间亲缘关系及资源遗传多样性作系统研究。本研究采用SRAP分子标记技术对绣球属植物的11份野生种和8份栽培品种进行了亲缘关系研究,其主要研究如下:1.采用单因素试验设计方法建立了绣球属SRAP分子标记最佳反应体系为25μL:10×PCR Buffer2.5μL、DNA模板30ng、Mg2+1.6mmol/L、dNTPs0.6m-mol/L、Taq聚合酶3.5U、引物0.2μmol/L×2。所选扩增程序为94℃预变性4min,然后94℃变性1min,35℃退火1min,72℃延伸2min,共5个循环;后30个循环仅将退火温度改为55.5℃,最后72℃延伸5min。结果表明该体系扩增出的条带清晰,多态性丰富,重复性好。2.从110对引物中筛选出了14对扩增条带清晰、多态性丰富的引物组合,利用筛选出的引物对20份绣球属材料进行了SRAP扩增,共扩增出233条带,其中多态性带为232条,多态性比率为99.7%,平均每对引物产生16.4条谱带,扩增片段在100bp~3000bp之间。利用Me6Em1引物组合就能把19份绣球属材料全部区分开来。说明了绣球属植物之间存在丰富的遗传多样性。3.利用NTSYSpc(版本2.1)软件中的Nei&Li和Jaccard两种相似系数计算方法,建立了Nei&Li和Jaccard相似系数矩阵,用UPGMA法得到19份绣球属材料的亲缘关系树状图,虽然两种相似系数计算方法的GS值不同,分别在0.2290-0.9231和0.1293-0.8571之间,但聚类结果是一致的,揭示了相同的亲缘关系。基于SRAP的聚类分析,在GS值分别为0.43和0.27处,所有材料聚为4类,其中1号伞形绣球(H.chinensis)单独聚为1类;第2类包括除18号品种外的所有栽培种;第3类包括栽培种18(H.macrophylla ’Kuhnert’)和野生种蜡莲绣球(H.strigosa)、阔叶蜡莲绣球(H.strigosa var.)、长柄绣球(H.longipes)、大枝绣球(H.rosthomii)、紫背绣球(H.strigosa var.)、光柄绣球(H.glabripes)、柔毛绣球(H.villosa)、狭叶绣球(H.lingii);第4类包括6号圆锥绣球(H.paniculata)和10号白背绣球(H.hypoglauca)。根据SRAP聚类结果分析:绣球属19份供试材料划分为3个系,即绣球花系(Ser. Petalanthae),由伞形绣球和绣球花7个栽培品种12(H.macrophylla)、13(H.macrophylla ’Leuchtfeue’)、14(H.macrophylla ’Snowball’)、15(H.macro-phylla ’Adria’)、16(H.macrophylla ’Lavbla’)、17(H.macrophylla ’Lavbla’)、19(H.macrophylla)组成;腊莲系(Ser. Piptopetalae):由腊莲绣球、阔叶腊莲绣球、长柄绣球、大枝绣球、紫背绣球、柔毛绣球、光柄绣球、狭叶绣球和栽培种18组成;挂苦树系(Ser. Heteromallae),由圆锥绣球和白背绣球组成。其中18号品种的划分结果还有待进一步验证。
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