以毛花猕猴桃(Actinidia eriantha)‘赣猕6号’品种为试材,对其果实发育期间抗坏血酸(AsA)含量及其合成相关酶Gal LDH与APX含量的动态变化进行了测定分析。采用改良氯化锂沉淀法从果实中提取RNA,克隆得到了AsA合成酶GalUR、GME和GMP基因的cDNA全长序列和GPP基因的cDNA序列片段。利用qPCR技术对供试品种果实发育过程中AsA合成相关酶基因GME、GMP、GalUR、GPP、GalLDH、GalDH和GGP的表达特征进行了分析,研究结果可为解析毛花猕猴桃果实AsA富集的分子机制提供理论依据。主要研究结果如下:1.对毛花猕猴桃‘赣猕6号’整个发育期间果实AsA水平的动态变化进行了测定与分析,AsA含量在果实发育前期快速积累,盛花后53d(Days After Full Blossom,DAFB)达到最高值(22.43mg/g),DAFB112d时AsA含量不断下降至7.65mg/g,此后AsA的形成和降解达到平衡,积累量基本不变,成熟期的AsA含量稳定在6.56 mg/g。Gal LDH酶活性在果实发育至成熟的过程中始终保持较高的水平,在DAFB53d时活性最强,达到1.95U/g FW。毛花猕猴桃果实发育后期APX酶活性较高,果实成熟期APX酶活性最强(1.957U/g FW)。2.GalUR、GME与GMP基因的cDNA与其他植物中的该基因分别都有较高的同源性。测序结果表明克隆得到的GalUR基因cDNA全长为1031bp,共编码322个氨基酸。该基因与美味猕猴桃(ADB85571.1)中的GalUR1同源性为95%。AsA合成酶GME基因序列长为1139bp,编码376个氨基酸,与美味猕猴桃(Actinidia deliciosa)及山梨猕猴桃(Actinidia rufa)的GME氨基酸同源性均为98%;GMP序列长为1392bp,编码361个氨基酸,与阔叶猕猴桃GMP基因氨基酸同源性达97%。3.利用qPCR技术对毛花猕猴桃‘赣猕6号’果实发育过程中AsA合成相关酶基因GMP、GME、GGP、GPP、GalDH、GalLDH和GalUR的表达进行了分析。GalUR基因在果实发育过程中的相对表达量前期先上升后期逐渐下降,与AsA含量变化趋势一致,表明D-半乳糖醛酸途径可能存在于毛花猕猴桃的AsA合成中。GME与GMP基因的相对表达量在前期DAFB34d至DAFB53d内剧烈上升,随后逐渐降低。GPP、GalDH、GalLDH基因表达量的趋势类似,在发育起始期(DAFB34d)的表达量最大,随后缓慢下降。GPP表达量呈现逐渐下降的变化趋势,最高点出现在DAFB53d,而果实发育期间DAFB95d时表达量最低。L-半乳糖途径中的酶基因的表达为该途径存在于毛花猕猴桃的AsA合成中亦提供了依据。GME基因在全过程中表达量高于其他基因3-5倍,可以推测L-古洛糖途径在毛花猕猴桃的AsA的合成中也起到作用。