【摘 要】
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桃是典型的呼吸跃变型果实,呼吸强度的大幅度增加使得活性氧(reactiveoxygenspecies,ROS)大量累积,继而导致果实软化、褐变,造成商品价值和营养价值的降低。呼吸跃变的出现标志着果实的成熟,也意味着细胞乃至机体衰老的开始。而线粒体的氧化损伤是加速细胞衰老和死亡的一个主要因素,因此缓解线粒体的氧化损伤对于维持采后桃果实的品质十分重要。一氧化氮(nitr
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桃是典型的呼吸跃变型果实,呼吸强度的大幅度增加使得活性氧(reactiveoxygenspecies,ROS)大量累积,继而导致果实软化、褐变,造成商品价值和营养价值的降低。呼吸跃变的出现标志着果实的成熟,也意味着细胞乃至机体衰老的开始。而线粒体的氧化损伤是加速细胞衰老和死亡的一个主要因素,因此缓解线粒体的氧化损伤对于维持采后桃果实的品质十分重要。一氧化氮(nitricoxide,NO)作为一种生物信号因子,可以通过刺激抗氧化系统来防御ROS,适宜浓度的NO被认为能参与控制呼吸和细胞凋亡的线粒体信号的不同传导途径起到保护线粒体的作用。本论文以“新泰红”桃果实为试验材料,分别使用双蒸水(空白对照)、15μmol?L~(-1)NO溶液、5μmol?L~(-1)c-PTIO(NO清除剂)溶液处理桃果实,并贮藏于0℃的环境中。研究了贮藏期内不同处理对于桃果实贮藏品质、线粒体功能、线粒体DNA(mtDNA)的损伤情况以及DNA复制关键因子PpPrimPol的影响,研究结果如下:(1)NO处理可以有效地延缓色差L*值的减小、硬度的下降,从而减轻了采后桃果实的褐变及软化;NO处理延缓了可溶性固形物含量及呼吸速率的增加,从而减少了桃果实内能量和营养物质的消耗,并且低温贮藏能够减少果品的蒸腾作用所造成的水分散失,进而抑制了失重率的增大。(2)NO处理能够维持较高的线粒体膜电势、延缓线粒体呼吸电子传递链上复合物Ⅰ-Ⅲ及交替氧化酶(alternativeoxidase,AOX)的活性的降低,从而维持了呼吸电子传递链中细胞色素途径和交替途径的高效运行,进而抑制了线粒体中ROS的产生。同时,NO处理提高了线粒体内膜两侧NAD(P)H脱氢酶的活性,从而维持了线粒体内膜内、外两侧的氧化还原平衡。另外,NO处理维持了较低水平的线粒体内细胞色素c含量及复合物Ⅳ活性,从而降低了线粒体的呼吸耗氧量并抑制了细胞凋亡。(3)NO处理提高了线粒体内三羧酸循环中的柠檬酸合酶、丙酮酸脱氢酶复合物、琥珀酸脱氢酶、延胡索酸酶等相关酶的活性,从而促进了三羧酸循环的进行,这不仅满足了植物体增加碳骨架的需要,为线粒体呼吸电子传递链提供了充足的底物,还减少了氧化应激,维持了mtDNA的完整性。(4)NO处理能够延缓mtDNA拷贝数的减少,进而有效地维持了mtDNA基因组的稳定性;NO能够显著地降低线粒体内ROS的含量,从而下调了mtDNA的8-羟基-2-脱氧鸟苷(8-OHdG)水平。(5)NO处理能够上调DNA复制关键因子PpPrimPol的基因表达水平,促进DNA的复制。通过PCR等技术克隆了DNA复制关键因子—PpPrimPol的编码序列(CDS)区全长1764bp,编码587个氨基酸。
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