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杨干象是一种世界性钻蛀性害虫,已成为对林业发展破坏极大、亟待防治的重要检疫性害虫之一。目前,国内外开展了利用白僵菌等生物防治措施控制该害虫种群的研究,但是生物防治技术的适用期、效果等尚需提升。本文将探索拓展利用病原真菌防治杨干象的适用期、提升其杀虫效果的技术。在此基础上探索病原微生物与天敌昆虫防治联合控制杨干象的技术;并开展了寄主植物挥发物对杨干象触角电位和行为反应的影响,筛选出具有显著驱避和引诱作用的化合物及有效浓度,旨在为提升杨干象的综合治理水平奠定技术基础。具体研究结果如下:(1)不同菌株对杨干象幼虫的毒力效果不同;在球孢白僵菌中添加亚麻籽油性助剂后,可以显著提升白僵菌对杨干象成虫杀虫效果,且加速成虫死亡;添加助剂后对雄性杀虫效果优于对雌性杀虫效果。采用5株白僵菌和1株金龟子绿僵菌对杨干象幼虫进行致病力测定,其中3株球孢白僵菌对杨干象幼虫具有较强的毒力。这3株的毒力大小为:菌株CFCC81428>CFCC83116>CFCC87298。通过3株球孢白僵菌1.0×10~4~1.0×10~8孢子/m L 5个浓度梯度对杨干象幼虫的侵染效果,确定杨干象幼虫累积死亡率与处理时间和孢子悬浮液浓度呈正相相关,球孢白僵菌CFCC81428的毒力作用仍为最强。利用高毒力球孢白僵菌CFCC81428及添加亚麻籽油作为增效剂的球孢白僵菌CFCC81428,分别侵染杨干象雌性和雄性成虫20天,雌雄成虫的死亡率差异十分显著,添加油性助剂后雌雄成虫的累计死亡率分别为83.8±11.8%和91.7±11.8%,而仅用白僵菌侵染雌雄成虫的累计死亡率分别为16.7%和41.7±9.6%,比未加油性助剂死亡率分别增加了66.6%和50%;白僵菌中添加油性助剂后,雌雄成虫的LT50分别为8.72天和7.94天,而仅用白僵菌侵染雌雄成虫后的LT50分别为28.68天和25.26,同未加油性助剂缩短19.96天和17.32天。(2)通过扫描电镜观察白僵菌侵染杨干象幼虫体壁的变化,确定侵染后12 h,分生孢子萌发产生芽管,并以芽管的形式穿透虫体体壁,侵染后60~72 h,开始产生菌丝体,侵染后96~120 h,菌丝体将幼虫体壁及气门周围覆盖。通过扫描电镜观察,未添加亚麻籽油性助剂球孢白僵菌侵染杨干象成虫,侵染后10~12天,体壁可被白僵菌菌丝覆盖;而添加亚麻籽油性助剂后,加速了孢子萌发的速度,侵染过程加快,侵染后5天,成虫体腔内已经布满了大量菌丝,侵染后7~8天,菌丝体大量覆盖成虫体表。(3)研究感染了未添加油性助剂球孢白僵菌与添加油性助剂的球孢白僵菌CFCC81428菌株对杨干象成虫体内的解毒酶和保护酶活性变化规律发现:其感染了添加助剂的白僵菌成虫解毒酶(GST、Car E)活性大部分高于仅用白僵菌处理后的解毒酶活性。杨干象成虫在感染白僵菌120 h内,随着侵染时间的增加,CAT和POD活性逐渐被抑制,其中感染添加油性助剂的球孢白僵菌后,抑制作用更加明显。而SOD活性在添加油性助剂后,大部分时间点处于激发状态,感染120 h,SOD活性开始降低,SOD在成虫感染白僵菌中起到了主要的保护作用。多酚氧化酶PPO在杨干象感染白僵菌的免疫防御中,发挥了最主导的作用,研究发现杨干象幼虫感染白僵菌6~48 h和雌雄成虫感染添加油性助剂和未添加油性助剂的球孢白僵菌24~120 h后,PPO活性几乎都高于对照,说明在这个时期白僵菌毒素或者孢子可能已经进入杨干象体内的血淋巴中,并且激发了杨干象的免疫系统,此时杨干象体内的PPO在抵抗白僵菌菌丝的生长及毒素的分泌中发挥着重要的作用。(4)3种高毒力球孢白僵菌感染杨干象幼虫后,被感染者体内总糖含量随处理时间的增加,整体呈下降趋势,其中48 h总糖含量降为最低,均低于对照组;而杨干象成虫感染添加油性助剂的白僵菌后,虫体内总糖含量下降的更快,其中雄性成虫体内可溶性糖含量低于雌性;被感染后的杨干象幼虫体内游离脂肪酸含量整体表现为先升高后降低的趋势。被感染后的杨干象成虫,其游离脂肪酸含量大部分都高于对照组,感染添加油性助剂后的球孢白僵菌96 h 4个处理时间点内,其体内游离脂肪酸含量要高于单独感染白僵菌的成虫,整体呈现为先增加后降低的趋势。被感染后的杨干象幼虫同对照相比,可溶性蛋白含量高于对照组;杨干象成虫感染添加油性助剂的白僵菌后,其成虫整体可溶性蛋白的含量大部分处理时间点要高于仅感染白僵菌的成虫体内可溶性蛋白的含量。(5)利用所筛选后的病原真菌与3种天敌昆虫防治杨干象,取得良好防治效果。其中杨干象幼虫分别与花绒寄甲成虫、白蜡吉丁肿腿蜂按照1:4,与摩泽蒲螨按照1:40000比例分别在半自然条件下与林间对杨干象进行的防治效果要分别好于花绒寄甲成虫、白蜡吉丁肿腿蜂按照1:2,与摩泽蒲螨按照1:20000的释放比例。3种天敌昆虫均能对杨干象幼虫产生良好致死效果,其致死效果由大到小为摩泽蒲螨>花绒寄甲成虫>白蜡吉丁肿腿蜂。林甸和北票两块试验地杨干象幼虫侵染效果的试验证明,CFCC81428仍然是致病力最强的菌株,CFCC81428、CFCC83116、CFCC87298可作为高毒力球孢白僵菌对杨干象幼虫进行林间生物防治。在半自然条件下,利用添加亚麻籽油作为增效剂的球孢白僵菌CFCC81428侵染杨干象成虫,雌雄成虫的死亡率分别为77.8±12.3%和83.3±16.8%而仅用白僵菌侵染杨干象雌雄成虫后的死亡率分别为13.9%和17.8±2.6%,死亡率分别提高了63.9%和49.5%,白僵菌中添加油性助剂后,雌雄成虫的LT50分别为9.42天和10.47天,而仅用白僵菌侵染雌雄成虫后的LT50分别为26.51天和30.59天,雌雄成虫的LT50同未加油性助剂缩短18.57天和20.12天。(6)杨干象雌雄成虫对10种杨树挥发物的EAG反应值均随着浓度的增加而增大,其中对0.1 mol/L以上反-2-己烯醛浓度,其EAG反应值均大于5 m V。杨干象雄虫在嗅觉仪与风洞测试中,对2 mol/L反-2-己烯醛、1 mol/L罗勒烯和2 mol/L柠檬烯整体表现为驱避作用,对10-3 mol/L和10-2 mol/L 3-戊醇整体表现为引诱作用。杨干象雌虫在嗅觉仪与风洞测试中对1 mol/L乙酸叶酸醇整体表现引诱作用,1 mol/L正壬醛整体表现为驱避作用。综上所述,球孢白僵菌中添加亚麻籽油作为增效剂,对杨干象成虫进行防治,其致死效果十分理想,通过扫描电镜对成虫体壁的超微结构观察,确认添加亚麻籽油性助剂后,加速了白僵菌侵染成虫的整个过程。添加亚麻籽油性助剂后,其成虫体内酶活性与营养物质与未加助剂后具有差异性表现。3种天敌昆虫均能成虫寄生杨干象幼虫,可在林间对杨干象进行天敌防治。CFCC81428、CFCC83116、CFCC87298可作为高毒力球孢白僵菌对杨干象幼虫进行林间生物防治。