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第一部分靶向鼻咽癌survivinshRNA质粒表达载体的构建鉴定目的构建pSIREN-survivin/shRNA重组质粒并测序鉴定,为探索鼻咽癌基因治疗的RNA干扰（RNAi）奠定基础。材料与方法根据基因库survivin cDNA序列（NM001168）及Reynolds设计原则,设计并合成两端有酶切位点的65个碱基的寡核苷酸链,退火成互补双链后用T4DNA酶克隆至线性化的RNAi-Ready pSIREN-DNR-DsRed-Express质粒中；转化大肠杆菌DH-5a菌株,提取质粒行酶切鉴定,测序分析。结果PCR扩增片断与预期结果相符；双酶切证实重组载体构建成功,插入片断测序结果与合成的寡核苷酸序列一致。结论成功构建重组质粒pSIREN-survivin/shRNA,为下一步用脂质体包装并转鼻咽癌组织细胞的研究打下基础。第二部分小分子干扰RNA抑制survivin基因表达诱导鼻咽癌CNE-2凋亡的研究目的观察应用小分子干扰RNA（small interfering RNA, siRNA）技术抑制鼻咽癌CNE-2细胞survivin表达对细胞凋亡和增殖的影响。材料与方法设计、合成特异性抑制survivin表达的shRNA,转染CNE-2细胞,半定量RT-PCR检测转染后细胞内survivin mRNA变化,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率,MTT检测细胞的增殖。结果质粒转染效率约为（46.9±1.55）%；转染阳性质粒组24h survivinmRNA和蛋白抑制率分别为：（41.58±0.63）%、（68.29±0.52）%；48h抑制率分别增至（63.64±0.96）%、（70.83±0.48）%；阳性质粒转染组24h凋亡率为（36.24±0.78）%,48h增加至（50.37±0.85）%,显著高于阴性对照组和未处理组,阳性质粒转染组S期细胞减少,G2/M期所占比例增高,出现了G2/M期的阻滞现象；MTT显示阳性质粒转染组细胞的生长减缓。结论特异性shRNA可以有效干扰鼻咽癌细胞内survivin mRNA和蛋白的表达,诱导细胞的凋亡和抑制细胞的增殖。第三部分RNAi介导survivin抑制鼻咽癌CNE-2裸鼠移植瘤的实验研究目的探讨靶向survivin基因的短发卡RNA （short hairpin RNA, shRNA）对人鼻咽癌CNE2裸鼠移植瘤生长的影响。材料与方法构建裸鼠荷瘤模型,通过瘤内多点注射、脂质体转染质粒,测定肿瘤生长体积、用半定量RT-PCR和免疫组化测定survivin mRNA和蛋白的表达,用透射电镜检测survivin shRNA对细胞凋亡的影响并对裸鼠肝肾功进行检测。结果survivin基因序列特异shRNA能有效而稳定地抑制鼻咽癌移植瘤survivin mRNA和蛋白的表达；显著抑制肿瘤组织的生长,促进细胞凋亡,并对裸鼠肝肾功能短期无影响。结论RNAi技术能有效抑制鼻咽癌移植瘤survivin的表达,降低鼻咽癌细胞的增殖能力,促进鼻咽癌细胞凋亡,减缓移植瘤的生长。