【摘 要】
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链格孢菌广泛存在于生物界,是污染谷物、油籽与果蔬的一种极为常见的腐生菌和条件致病菌。链格孢霉毒素是由链格孢菌产生的一类有毒代谢产物的总称,广泛存在于土壤、谷物和蔬菜水果中,是对人类健康危害极为突出的一类真菌毒素。婴幼儿食品（米粉、奶粉以及混合果泥）配料中的谷物、植物油和水果蔬菜易受到链格孢霉菌污染,因而链格孢霉毒素成为该类食品的重点检测对象。针对混合果泥、奶粉和米粉三大类不同基质的婴幼儿食品基质构
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链格孢菌广泛存在于生物界,是污染谷物、油籽与果蔬的一种极为常见的腐生菌和条件致病菌。链格孢霉毒素是由链格孢菌产生的一类有毒代谢产物的总称,广泛存在于土壤、谷物和蔬菜水果中,是对人类健康危害极为突出的一类真菌毒素。婴幼儿食品（米粉、奶粉以及混合果泥）配料中的谷物、植物油和水果蔬菜易受到链格孢霉菌污染,因而链格孢霉毒素成为该类食品的重点检测对象。针对混合果泥、奶粉和米粉三大类不同基质的婴幼儿食品基质构成特点,建立合适的前处理方法并结合超高效液相色谱串联质谱（Ultra Performance Liquid Chromatography–tandem Mass Spectrometry,UPLC-MS/MS）对三种基质中7种典型的链格孢霉毒素进行检测分析,并将开发的检测方法用于样品检测。主要研究内容和结果如下:（1）优化并建立了Qu ECh ERS（quick,easy,cheap,effective,rugged,and safe）-超高效液相色谱串联质谱（UPLC-MS/MS）快速测定婴幼儿混合果泥中链格孢酚（alternariol,AOH）、交链格孢酚单甲醚（alternariol monomethyl ether,AME）和交链孢烯（altenuene,ALT）、细交链格孢菌酮酸（tenuazonic acid,Te A）、腾毒素（tentoxin,Ten）、交链孢毒素I（altertoxin I,ATX-I）、细格菌素（altenusin,ALS）7种常见链格孢霉毒素的检测方法。具体为:待测样品经1.5%甲酸乙腈提取,在不加脱水剂和纯化剂的情况下,经加纯水和Na Cl盐析后,以Waters ACQUITY UPLC BEH C18柱分离,电喷雾正负离子交替多反映监测模式分析。该方法在1～50 ng/m L的浓度范围内线性关系良好,判定系数R~2≥0.9924,检出限范围为0.18～0.53μg/kg,3个不同加标水平的平均回收率为79.5%～106.7%,RSD≤9.78%。（2）优化并建立了同时检测婴幼儿奶粉中7种链格孢霉毒素（AOH、AME、ALT、Te A、Ten、ATX-I、ALS）的固相萃取-UPLC-MS/MS的检测方法。具体为:分别对提取剂比例、提取方式以及固相萃取过程进行优化,在最佳条件下的结果显示:该方法在1～50 ng/m L的线性范围内线性关系良好,判定系数R~2≥0.9903,检出限范围为0.15～0.64μg/kg,在3个加标回收率的条件下,平均回收率为73.4%～112.8%,RSD≤8.96%。（3）针对婴幼儿米粉中7种链格孢霉毒素（AOH、AME、ALT、Te A、Ten、ATX-I、ALS）,优化并建立了固相萃取-UPLC-MS/MS的检测方法。具体为:前处理采用1.5%甲酸乙腈-甲醇（v:v=4:1）提取婴幼儿米粉样品,振荡离心提取后,取上清液与纯水成1:4的比例混合,再用HLB萃取小柱净化,依次活化、上样、淋洗洗脱后,氮吹复溶,过0.22μm滤膜检测。结果显示:该方法在1～50 ng/m L的线性范围内线性关系良好,判定系数R~2≥0.9934,检出限范围为0.11～0.58μg/kg,在3个加标回收率的条件下,平均回收率为76.8%～107.7%,RSD≤9.12%。（4）运用所建立的方法对婴幼儿食品（混合果泥、奶粉、米粉）分别进行检测,结果发现婴幼儿食品中均有不同程度的链格孢霉毒素检出,其中婴幼儿混合果泥污染较为严重,婴幼儿奶粉污染情况相对较轻。
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