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目的:胃癌具有早期即可发生淋巴转移的特点,但其分子机制尚不明确。我们前期研究提示14-3-3β极有可能是影响胃癌的生物学行为更为关键的蛋白,可能在胃癌的淋巴结转移中发挥着重要的作用,并且该蛋白对胃癌患者的预后存在着负性相关。基于此,本课题将研究14-3-3β与胃癌发生发展的相关性,特别是14-3-3β与胃癌淋巴转移之间的关系,并初步探讨其可能的分子机制。 方法:以胃腺癌并接受胃切除术的患者为研究对象,采用TNM分期中的N分期标准把所有纳入病例分为:无淋巴结转移组(27例),低淋巴结转移组(40例),高淋巴结转移组(37例)。免疫组织化学法检测14-3-3β蛋白在胃癌组织中的表达并进行病理评分,应用荧光实时定量聚合酶链反应法检测14-3-3β mRNA在胃癌组织及癌旁组织中的表达水平;DNA亚硫酸盐测序方法检测YWHAB基因启动子甲基化修饰情况。 结果:(1)无淋巴结转移组、低淋巴结转移组和高淋巴结转移组患者胃癌组织中14-3-3β蛋白免疫组化结果评分有差异,高淋巴结转移组癌组织14-3-3蛋白评分均高于无淋巴结转移组、低淋巴结转移组。胃癌14-3-3β蛋白的表达评分与患者的脉管浸润、侵犯周围脏器、肿瘤大小、浸润深度、肿瘤远处转移、肿瘤分期没有明显相关性,而与胃癌的淋巴结转移情况对表达评分有影响,淋巴结分期高的患者表达评分高于淋巴结分期低的患者。肿瘤大小在明显影响在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、期病人的预后,肿瘤大小可作为评估胃癌病人预后指标。 (2)无淋巴结转移组胃癌患者癌组织中14-3-3βmRNA相对表达量为1.52±1.28,对应正常组织标本为1.03±0.05。胃癌组织中14-3-3β mRNA的相对表达水平与对应的正常组织差异无统计学意义;低淋巴结转移组胃癌患者癌组织中14-3-3β mRNA相对表达量为1.13±0.89,正常组织为1.02±0.03,胃癌组织中14-3-3β mRNA的相对表达水平与对应的正常组织差异无统计学意义;高淋巴结转移组胃癌患者癌组织中14-3-3βmRNA相对表达量为1.35±1.24,正常组织为1.03±0.04,胃癌组织中14-3-3βmRNA的相对表达水平显著高于对应的正常组织。胃癌组织中14-3-3βmRNA的相对表达量与患者的脉管浸润、是否侵犯周围脏器、肿瘤大小、浸润深度、肿瘤远处转移、肿瘤分期没有明显相关性,而淋巴结转移情况对表达量有显著影响,淋巴结分期高的患者相对表达量高于淋巴结分期低的患者。 (3)无淋巴结转移组、低淋巴结转移组和高淋巴结转移组患者胃癌组织中14-3-3β蛋白YWHAB基因启动子的甲基化频率分别为2.32±1.29、1.71±0.91、2.89±1.09。无淋巴结转移组、低淋巴结转移组和高淋巴结转移组患者之间的甲基化频率无统计学差异。胃癌组织中14-3-3蛋白中YWHAB基因中CpG岛的甲基化整体发生频率较低,并且发生甲基化的频率与淋巴结转移、肿瘤大小、是否侵犯周围脏器、有无脉管侵犯、肿瘤浸润深度及肿瘤分期均无明显相关性。 结论:胃癌淋巴转移水平高者胃癌组织中14-3-3β蛋白及其mRNA表达水平为高;14-3-3β蛋白及其mRNA表达水平与胃癌患者性别、年龄、肿瘤大小及肿瘤分期等因素未见相关性,与胃癌细胞淋巴转移显著相关;肿瘤大小在明显影响在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、期病人的预后,肿瘤大小可作为评估胃癌病人预后指标。胃癌组织中14-3-3β蛋白YWHAB基因中CpG岛发生甲基化的频率与淋巴结转移、肿瘤大小、是否侵犯周围脏器、有无脉管侵犯、肿瘤浸润深度及肿瘤分期均无相关性。