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目的:观察色素形成相关蛋白小眼球相关转录因子(microphthalmia-associated transcription factor,MITF)、酪氨酸酶(Tyrosinase)、酪氨酸酶相关蛋白1(tyrosinase related protein-1,TRP1)、视网膜色素上皮细胞65蛋白(retinal pigment epithelialprotein-65,RPE65)在BN大鼠胚胎视网膜发育过程中的表达情况,为探讨色素相关性眼病和遗传性视网膜变性疾病的病理机制、寻求视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelial,RPE)更新、替代治疗的新策略提供实验依据。方法:根据胎龄和鼠龄,分别获取E7组(胎龄第7天,embryo 7)、E14组、P0组(相当于E21的新生鼠、postnatal 0)、W10组(出生后10周的成年鼠,week 10)BN大鼠,用抽签法随机选取20眼(每只胎鼠只取1只眼做同种抗体检测),在光镜和荧光显微镜观察,采用免疫组织化学法检测色素形成相关蛋白MITF、Tyrosinase、TRP1、RPE65在视网膜发育过程中的表达。结果:胚胎视网膜发育的形态学观察:在胚胎第7天时,视杯形成,分内外两层。外层为无色素颗粒的假定的视网膜色素上皮层(retinalpigment epithelial,RPE),内层为假定的神经上皮层。胚胎14d时,外层色素上皮细胞呈单层排列,内层神经上皮层的细胞为16～18层。胚胎21d(新生鼠)可见外成神经细胞层和内成神经细胞层形成,内成神经细胞层的细胞向内迁移为神经节细胞层。成年大鼠神经节细胞层、内核层、外核层、视网膜色素上皮层均发育成熟、结构清楚。胚胎视网膜发育过程中色素形成相关蛋白的表达:在胚胎第7天(E7),MITF、Tyrosinase、TRP1、RPE65均阴性表达。在胚胎第14天(E14),MITF、Tyrosinase、TRP1免疫组织化学分析结果均显示:在视网膜内层神经上皮层及视网膜色素上皮层(RPE)的细胞胞核和胞浆中均出现明显的棕黄色颗粒,为阳性表达;但RPE65阴性表达。在新生期(P0),MITF、Tyrosinase、TRP1均阳性表达,表达部位和强度与E14大致相同。与E14相比,MITF在RPE中的表达组明显增强,且强于在内成神经细胞层的表达。RPE65局限在视网膜色素上皮细胞的胞浆和胞核中表达。在成年期(W10),MITF表达沉默:Tyrosinase、TRP1在内核层细胞浆和胞核中的表达强度较E14组、P0组下降;RPE65在RPE的表达强度下降。结论:1 BN大鼠的胚胎视网膜于胚胎第2周开始发育,在出生时尚未发育完全。2 MITF在胚胎中晚期(E14～P0)的视网膜内层神经上皮层及视网膜色素上皮层(RPE)中表达,但在胚胎晚期的RPE中表达增强,在成年期(W10)表达沉默。3 Tyrosinase、TRP1在中晚期胚胎的视网膜内层神经上皮层及视网膜色素上皮层(RPE)中平稳表达,于成年期(W10)表达下降。4 RPE65在晚期胚胎的视网膜色素细胞中强表达,尽管在成年期表达强度减弱,但仍然持续表达。