蓝光影响皮肤色素沉着及其机制的研究

来源 :昆明医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:goodyoujun
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[目的]探索蓝光(blue light,BL)对角质形成细胞(keratinocytes,KC)、成纤维细胞(fibroblast,FC)及黑素细胞(melanocyte,MC)生物学活性的影响与其诱导皮肤发生色素沉着的相关性,以期为色素沉着性疾病的防治及新型光防护提供理论依据。[方法]1.采用不同剂量BL照射21例云南地区Ⅲ-Ⅳ型正常女性皮肤,通过研究者全球评分量表(Investigator’s Global Assessment Scale,IGAS)评估不同剂量BL照射受试者皮肤后不同时间位点产生色素沉着的差异,使用分光光度计测量照射部位的L*值,并计算△L*值。2.采用不同剂量BL照射KC、FC和MC,于照射后不同时间位点采用CCK-8试剂盒检测细胞的增殖活力;以NaOH裂解法检测MC黑素颗粒的合成;酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测 KC 分泌 IL-18、NGF,FC 分泌 IL-33、KGF 的含量;逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)及蛋白质免疫印迹(western blot,WB)法分别检测黑素合成酶mRNA及蛋白的表达。采用SPSS 26及Graphpad prism软件进行统计分析及绘图。[结果]1.剂量为20、40、60及80J/cm2波长为400~520nm BL照射Ⅲ-Ⅳ型正常女性皮肤后即刻,所有剂量照射组照射部位的IGAS色素沉着评分高于未照射部位(P<0.005),L*值低于未照射部位(P<0.005),且80J/cm2 BL照射组△L*值明显低于20J/cm2照射组(P<0.005);照射后24h及2w,除20J/cm2外余BL照射组IGAS色素沉着评分均高于未照射部位(P<0.005),所有剂量BL照射组L*值均明显低于未照射部位(P<0.005),且60及80J/cm2照射组△L*值均低于即刻(P<0.005)。2.剂量为5、10、20、30及40J/cm2波长为440~450nm BL单次照射KC、FC,①CCK-8结果示:照射后即刻,20、30及40 J/cm2照射组KC及FC增殖活力均较0 J/cm2对照组明显下降(P<0.005);照射后24h,5及10 J/cm2组KC及FC增殖活力均较对照组明显下降(P<0.005),且BL照射后即刻至48h KC及FC增殖活力下降程度呈时间及剂量依赖性。②ELISA结果示:照射后即刻,30及40 J/cm2 BL照射组KC培养液中IL-18和NGF和FC培养液中IL-33及KGF的浓度均明显高于对照组(P<0.005);照射后24h,10 J/cm2组培养液中IL-18、NGF的浓度也均明显高于对照组(P<0.005),且BL照射后即刻至48h IL-18、NGF、IL-33及KGF浓度增加程度呈剂量依赖性。3.剂量为5、10及20J/cm2 BL单次照射MC,①CCK-8结果示:照射后即刻,5、10和20 J/cm2照射组MC增殖活力均较对照组明显升高(P<0.008);照射后24h,10及20 J/cm2组MC增殖活力均较对照组显降低(P<0.008),且BL照射后24h至48h MC增殖活力下降程度呈剂量及时间依赖性。②NaOH裂解法结果示:照射后24h,所有BL照射组黑素颗粒合成率均较对照组明显升高(P<0.008),且呈剂量依赖性;照射后48h,所有剂量BL照射组均下调黑素颗粒合成率,但不具统计学意义(P>0.008)。③RT-PCR结果示:照射后即刻,10及20 J/cm2照射组酪氨酸酶(tyrosinase,TYR)、酪氨酸相关蛋白酶1(tyrosinase related protein-1,TRP-1)、多巴色素异构酶(dopachrome tautomerase,DCT)mRNA的表达水平均较对照组明显升高(P<0.008);照射后24h,5J/cm2照射组也较对照组明显升高(P<0.008);照射后即刻至24h,TYR、TRP-1、DCT mRNA的表达水平升高程度呈时间及剂量依赖性。④WB结果示:照射后即刻,20J/cm2照射组TYR、TRP-1、DCT蛋白的表达均明显高于对照组(P<0.008);照射后24h,5及10J/cm2照射组也均具统计学意义(P<0.008),且照射后即刻至24h,TYR、TRP-1、DCT蛋白的表达升高程度呈剂量依赖性。[结论]BL照射可诱导Ⅲ-Ⅳ型正常女性皮肤出现色素沉着,并与照射剂量相关。BL照射呈剂量及时间依赖性抑制KC和FC的增殖活力,同时促进KC分泌IL-18、NGF,FC分泌IL-33、KGF。5J/cm2 BL照射即刻增强MC的增殖活力,随BL剂量及时间增加反而抑制MC的增殖活力。BL照射呈剂量依赖性上调TYR、TRP-1、DCT的活性及促进黑素颗粒的合成。因此,BL可能通过影响KC、FC及MC的生物学活性从而诱导皮肤出现色素沉着性改变,故在加强紫外线防护的同时也应加强BL的防护。
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