大鼠肝门静脉海绵样变性过程中MMP-2,-9,TIMP-1,-2的表达及意义

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目的:本研究拟建立大鼠肝门静脉海绵样变性模型,从基因转录和蛋白质水平检测MMP-2、-9、TIMP-1、-2在大鼠门静脉及其周围组织的表达,探讨其在大鼠肝门静脉海绵样变性发生发展中的作用。  方法:将SD大鼠随机分为3组,模型组行门静脉部分缩窄造模处理,假手术组仅行门静脉游离探查,两组分别设2、4、6周3个时间点,正常组即不做任何处理的SD大鼠(术前造影后取材)。各组分别于术后3个时间点行门静脉造影观察门静脉系统的血流变化并取材,部分门静脉组织石蜡包埋后行HE染色镜下观察病变基本形态变化,并采用免疫组织化学法测定MMP-2、-9、TIMP-1、-2及CD31的表达;荧光定量PCR的方法检测大鼠门静脉及其周围组织的MMP-2、-9、TIMP-1及 TIMP-2 mRNA含量。  结果:成功构建并筛选出的大鼠模型组是33只,假手术组30只,正常组10只进入实验研究。门静脉造影及CD31免疫组化显示,模型组门静脉周围新生血管明显增多;RT-PCR与免疫组化结果分析显示:模型组各个时间点MMP-2表达水平与正常组和假手术组相比差异均有统计学意义,MMP-9的表达水平仅在术后第2周与正常组和假手术组同期相比差异有统计学意义;模型组TIMP-1和TIMP-2各个时间段的表达水平与正常组和假手术组相比差异无统计学意义;模型组术后第2周MMP-2/TIMP-2比值明显高于正常组和假手术组同期,差异有统计学意义。  结论: MMP-2、MMP-9表达升高以及MMP-2/TIMP-2的比值失衡可能是大鼠门静脉海绵样变周围血管新生的分子机制之一。
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