柱花草炭疽病生防菌筛选、抑菌物质分析及防病效果评价

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柱花草(Stylosanthes spp.)是热带地区种植面积最大、应用最广泛的豆科牧草。柱花草炭疽病(Stylo anthracnose)是影响柱花草生产的主要病害,胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)是引起该病的主要病原菌。本研究旨在筛选出对柱花草炭疽病具明显拮抗作用的生防菌株,并评价其生防效果。以现推广种植的抗病品种“热研2号柱花草”为研究对象,结合从柱花草上分离到的强致病力柱花草炭疽病菌菌株CH008为靶标菌,筛选出对其抑制作用较强的拮抗菌株并鉴定菌株种类,分析其抑菌代谢物质与生物学性能,并在田间评价生防菌株对柱花草炭疽病的生防效果。
  为研发柱花草炭疽病生防制剂,实现柱花草炭疽病绿色防控提供基础.本研究从柱花草叶片上分离获得33株细菌,通过平板对峙法筛选出3株对柱花草炭疽病菌菌株CH008有较强抑制作用的拮抗细菌B621、B800、gt2;B621、B800、gt2对胶孢炭疽菌的抑菌圈直径分别为24.9mm、20.6mm、19.9mm。同时菌株B62l、B800、gt2对橡胶树炭疽病菌、芒果炭疽病菌、西瓜枯萎病菌等3株常见植物病原真菌的抑菌活性较强,其抑菌率均在70%左右,表明3株拮抗菌株有较强的广谱抑菌性。
  通过菌落形态特征、革兰氏染色、芽孢染色、生理生化、16S rDNA以及gyrB特异性序列分析,鉴定菌株B621与gt2均为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),B800为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)。
  对菌株的抑菌物质进行了初步研究,生物学性能的相关实验结果表明,3株拮抗菌株均具有水解蛋白、降解纤维素、形成生物膜及产生铁载体的能力;菌株的挥发性物质对病原菌的生长也存在抑制作用,抑菌率均高于40%,抑菌效果显著。通过PCR扩增3株拮抗细菌脂肽类基因序列及其合成酶基因序列的检测,获得了Hag、taSA、Ipa-14、fenB共4个基因片段。结果表明3株拮抗菌株中均含有合成脂肽类物质及脂肽类合成酶的基因。
  田间试验表明,3株拮抗菌株发酵液对柱花草炭疽病有一定的防效,其中,在一个月刈割强度下的防效高于其它刈割强度。菌株gt2的防效最好,最高防效达78.4%,可为生产上柱花草炭疽病生物防治提供依据。
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