目的:对13个海口东寨港根泥样品进行微生物的分离与纯化,筛选出最适宜该地区土壤微生物生长的预处理方法、培养基、稀释梯度及酸碱度。方法:采用等比稀释法将样品稀释为10-1-10-5不同等级梯度,以梯度稀释法、风干法和差速离心法作为预处理方法分离真菌和放线菌,根据碳源、氮源及微量元素的不同配比配制培养基,采用p H3和p H7两个酸碱度,以期分离得到更多的微生物。最后通过形态特征和TLC特征比对菌株进行排重。结果:共得真菌77株,放线菌84株。其中真菌通过梯度稀释法得到72株,风干法得4株,差速离心法得1株,因此,最优处理方法为梯度稀释法;不同稀释梯度下,10-1得60株,10-2得6株,10-3得3株,10-4得5株,10-5得3株,故10-1条件下分离此真菌最为适宜;不同p H条件下,p H7条件下得到43株,p H3条件下得到29株,所以中性条件分离此真菌最适宜;不同培养基条件下,PDA培养基得23株,无机盐培养基得13株,麦芽培养基得13株,GYP培养基得13株,马丁培养基得10株,因而PDA培养基最适合分离此真菌。在84株放线菌中,梯度稀释法得到82株,风干法得2株,故梯度稀释法最适合分离此真菌;不同稀释梯度中10-1得64株,10-2得19株,10-3得1株,所以最优稀释梯度为10-1;不同p H条件下,中性条件下得到78株,酸性条件下得到6株,因此,中性条件最佳;不同培养基条件下,无机盐培养基得37株,麦芽培养基得17株,PDA培养基得13株,GYP培养基得9株,马丁培养基得6株,所以无机盐培养基最适合。结论:分离本实验中海口东寨港地区的土壤微生物,最适宜采用梯度稀释法,在中性条件下且稀释梯度较小时最佳。分离放线菌可采用无机盐培养基,真菌则适宜用PDA培养基。目的:复制溴隐亭诱导大鼠产后缺乳病理模型,从母鼠的泌乳量、仔鼠体重增长率、血清催乳素(PRL)水平以及乳腺和垂体的病理组织学等角度,比较四叶参(四地)的催乳作用。方法:选用成年健康SD大鼠96只,雌雄比例3:1合笼饲养,18天后,取出雄鼠,同时将雌鼠单笼饲养。取产仔时间相差小于24小时的56只母鼠为实验对象,调整每只母鼠带仔8只。实验设计:按母鼠体重随机分为:正常组、溴隐亭模型组、四叶参组(贵州组、安徽组、湖南组、山东组)及阳性对照药物乳泉颗粒组。除正常组外,各组于产后第2天起溴隐亭灌胃(0.5mg/kg/d),同时合并给药(四叶参组15 g/kg/d,阳性对照药物乳泉颗粒组2.6 g/kg/d)7天。实验第8天,以酶免法检测各组大鼠血清催乳素(PRL)水平,乳腺及垂体切片经HE染色,光镜下观察其病理组织学变化,计算母鼠每日3h泌乳量及仔鼠体重增长率。采用SPSS19.0统计软件对数据进行处理。结果:1.模型组的母鼠泌乳量、仔鼠体重增长率和催乳素(PRL)水平都低于正常组,差异具有显著性(p<0.01),说明复制母鼠产后缺乳模型成功;四叶参组均能在该剂量下升高上述3指标(p<0.05),证明四叶参能促进母鼠泌乳;四产地间比较差异无显著性(p>0.05)。2.病理组织学:正常组大鼠乳腺组织丰富,呈泌乳态,乳腺小叶分叶明显,腺泡充盈,腺管扩张,腺腔增大,充满嗜酸性分泌物,腺上皮呈柱状,多见初乳小叶;模型组大鼠乳腺主要由脂肪组织组成,乳腺小叶分叶不明显,腺泡稀少、分散,腺腔狭窄,仅个别可见少量分泌物;四叶参组病理组织学与正常组类似。正常组大鼠垂体组织学可见催乳素细胞结构正常,细胞核呈圆形或椭圆形,核内染色质分布均匀,胞浆内颗粒数量较多,且分布均匀、大小一致;模型组核内染色质聚集,胞浆内可见少量分布不均、大小不一的颗粒,少见异形颗粒。四叶参组均未见垂体组织形态学改变。结论:复制了溴隐亭(10ml﹒kg-1)诱导大鼠产后缺乳模型,证明四叶参(四地)水提物具有催乳作用,其机制与促进PRL的分泌有关。