论文部分内容阅读
癌症作为一个亟待攻克的世界性难题,早期诊断方法和新型抗癌药物的发明一直受到国内外科学家们的高度关注和重视。很多研究表明miRNA作为一种癌症指标与许多癌症有着密切的关系,因此可用于癌症的早期诊断。但其长度短,易降解,且在RNA中成分少的特点使得miRNA的检测面临巨大的挑战。此外,一些常用的检测方法(原位杂交、印迹法、实时-PCR等)比较耗时、灵敏度低,从而限制了它们的发展,因此找到一种简单而快速的检测方法显得尤为重要。半导体纳米颗粒由于具有超强荧光、光稳定性以及窄的发射峰等优点使其具有很好的潜力。除了癌症的早期诊断之外,抗癌药物的研发也是一种有效的治疗手段。基于以上背景,本文主要以功能化的半导体聚合物与NH2-ssDNA连接后作为探针对microRNA进行分型和定量;并将修饰后的中空金纳米球(HGNs)作为抗癌药物以达到抑制癌细胞生长的目的,为此做了以下几个工作:(1)采用共轭聚合物[(9,9-二辛基芴)-交替-共-(1,4-苯并-(2,1’,3)-噻二唑)](PFBT)与两亲性磷脂-聚乙二醇-羧基在纳米共沉淀下形成带负电荷的CPNs-COOH。通过荧光和紫外表征发现该纳米颗粒具有窄的激发峰和发射峰,适合于单颗粒追踪和细胞成像。此外,稳定性实验结果表明该纳米颗粒不易受外界环境的影响(pH,放置时间,盐浓度),证明其具有良好的稳定性。其独特的光学稳定性也在相应的显微成像实验中得到进一步验证。(2)我们将CPNs-COOH与NH2-ssDNA连接后形成的复合物作为一种荧光探针。在单分子层面上,用三种尺寸的荧光探针分别探究了在不同浓度的PBS中进行短暂杂交,选择最佳探针进行microRNAs中let-7a与let-7c的分型以及let-7a的定量分析。Matlab的分析数据表明32 nm的荧光探针最为合适。此外定量分析结果证实microRNAs的浓度与短暂杂交的粒子数成正比。(3)通过牺牲钴形成模板从而得到具有近红外特性的中空金纳米球 HGNs(Hollow Gold Nanospheres)。TEM 和 DLS 结果显示HGNs的粒径约为30 nm。紫外实验表明其吸收峰处于近红外区,可用于光热治疗。接下来,我们将狼蛛抗菌肽(Lycosin-I)这一抗癌多肽修饰于HGNs表面,以期望能够达到抑制癌细胞生长的效果。