【摘 要】
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背景:富含血小板血浆是自体全血经离心后得到的血小板浓缩物,由于其内部含有高浓度的血小板,经激活后可产生多种类型的生长因子,它们促进细胞增殖、迁移及组织修复重建,除了在美容整形手术中被广泛使用外,其在临床工作中也被用于治疗慢性肌腱炎、骨关节炎、糖尿病足、烧伤及各类创伤性疾患。由于人们日常工作及生活压力的逐渐加重,雄激素性脱发、斑秃的发病率不断提高,部分研究显示头皮注射富含血小板血浆后有促进毛发生长的
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背景:富含血小板血浆是自体全血经离心后得到的血小板浓缩物,由于其内部含有高浓度的血小板,经激活后可产生多种类型的生长因子,它们促进细胞增殖、迁移及组织修复重建,除了在美容整形手术中被广泛使用外,其在临床工作中也被用于治疗慢性肌腱炎、骨关节炎、糖尿病足、烧伤及各类创伤性疾患。由于人们日常工作及生活压力的逐渐加重,雄激素性脱发、斑秃的发病率不断提高,部分研究显示头皮注射富含血小板血浆后有促进毛发生长的作用,然而其有效性在临床上并未形成统一共识,且其作用机制仍不十分明确,这极大的限制了它在治疗脱发方面的应用。本研究旨在探索皮下注射富含血小板血浆后对毛发及毛囊生长的影响,并发掘其作用机制,从而为其应用于临床治疗诸如雄激素性脱发、斑秃等疾病提供理论依据。目的:观察富含血小板血浆对C57BL/6小鼠毛发及毛囊生长的影响,并发掘其相关作用机制。方法:取雌性C57BL/6小鼠20只,随机分为实验组及对照组,适应性饲养一周,实验第0天使用松香及蜂蜡混合物脱去小鼠背毛,统一所有小鼠毛囊周期,分两次腹腔注射5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷标记增殖细胞,分别于实验第1、5、9天于脱毛部位给予干预措施,其中实验组皮下注射富含血小板血浆,对照组注射同等剂量的生理盐水。每2日拍照,观察小鼠背部脱毛处皮肤毛发生长情况。在实验第3、10、18天每组各处死小鼠3只,取皮肤组织,完善组织学检查,使用蛋白质免疫印迹法及聚合酶链反应检测Wnt10b的蛋白质及m RNA表达。在实验第3天使用组织免疫荧光检测Wnt10b抗体在生长期毛囊的表达情况,同时完善组织标本的细胞增殖检测,以明确Wnt10b的表达与细胞增殖之间的内在联系。结果:皮肤拍照显示实验第0-6天,所有小鼠背部脱毛处皮肤均呈现粉红色,无毛发生长,自第8天起,同一时间点实验组小鼠较对照组皮肤颜色更深,毛发密度更高、生长更迅速,实验组及对照组间新生毛发颜色未见明显差异,而两组毛发颜色均较未脱毛部位有所加深。组织学结果提示实验第3天,实验组皮肤厚度大于对照组,两组毛囊数量无明显差异,但实验组毛囊处于生长期Ⅲc期,而对照组处于生长期Ⅱ期;实验第10天,两组在皮肤厚度、毛囊数量、毛囊形态上均无明显差异,其组织学符合毛囊生长期Ⅵ期特点;实验第18天,实验组皮肤厚度及毛囊数量小于对照组,所有毛囊均进入休止期,而对照组毛囊此时仍处于退行期。蛋白质免疫印迹及聚合酶链反应检测提示在所有时间点(实验第3、10、18天)实验组Wnt10b的m RNA及蛋白质表达均明显高于对照组。组织免疫荧光及Ed U细胞增殖检测证实在生长期实验组及对照组均在毛母质及内毛根鞘处有Wnt10b阳性信号及Ed U阳性细胞表达,但实验组信号强度及毛囊平均增殖细胞数均高于对照组。结论:皮下注射富含血小板血浆后提高了组织及毛囊内Wnt10b的表达,激活了经典的Wnt信号通路,在毛囊生长期促进了毛母质及内毛根鞘细胞的增殖,加速毛囊由休止期向生长期转化,加快了毛囊的生长及循环周期速度,这些特点使PRP有希望成为治疗雄激素性脱发、斑秃等脱发性疾病的新的选择,但是在本实验中我们并未发现其具备延长毛囊生长期、缩短休止期的能力,其对每个毛囊周期的具体影响,特别是在持续干预下对生长期及休止期毛囊持续时间的影响仍不明确,未来需要进行更多的动物实验及临床随机对照实验,以进一步验证PRP治疗雄激素性脱发及斑秃的安全性和有效性。
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