基因治疗在人类严重疾病治疗中具有重大的潜力和应用前景，其中通过siRNA（small interfering RNA）诱导RNAi(RNA interfering)来抑制mRNA表达是治疗肿瘤的一种新的途径途径。但是siRNA在体内使用时存在稳定性差、转染效率低的问题，因此siRNA在体内使用时需要一种有效的基因载体系统。本研究开发NGR多肽修饰的脂质-聚乙烯亚胺(BPEI)-siRNA复合物(NGR-Lipo/BPEI/siRNA)作为非病毒基因载体，主要包括以下内容：　　 以单因素实验法优化BPEI/siRNA压缩体的制备方法。结果表明：N/P=3时，压缩体对siRNA的包封完全；随着N/P的增加，压缩体粒径减小；缓冲液的类型对压缩体的性质有较大的影响，在20mM HEPES中能形成稳定的压缩体；siRNA的浓度在0.1μM～0.5μM之间时，压缩体的粒径随着siRNA浓度的增加而降低；siRNA的浓度在0.5μM～1.5μM之间时，压缩体的粒径随着siRNA浓度的增加而增加。根据单因素试验结果，压缩体制备最佳条件为：20mMHEPES(pH7.40)、N/P=10、CsiRNA=1μM，所得压缩体粒径在150nm左右、电位在30mV左右、siRNA的包封率高、稳定性较好。　　 以逆向蒸发法制备脂质体，包载BPEI/siRNA形成Lipo/BPEI/siRNA，考察其包封率。采用正交实验法优化Lipo/BPEI/siRNA的制备条件：磷脂：胆固醇(W/W)=2:1、油：水(V/V)=4:1、探超功率200w;利用NGR多肽中巯基与Lipo/BPEI/siRNA表面的马来酰亚胺基团发生加成反应，对Lipo/BPEI/siRNA进行靶向修饰。结果显示：NGR多肽能有效连接在Lipo/BPEI/siRNA的表面，NGR-Lipo/BPEI/siRNA粒径在120nm左右、电位在-20mV左右，siRNA包封率高，在含血清的培养基中放置6h，粒径没有显著变化。　　 非病毒载体系统在水溶液中稳定性差，因此宜将其制备成冻干粉保存。单因素实验法优化冻干保护剂的浓度和种类，选择1.5％蔗糖和1.5％海藻糖联合使用。制备的NGR-Lipo/BPEI/siRNA冻干粉外观较好，粒径、电位变化较小，siRNA包封率高，4℃放置三个月，稳定性良好。　　 体外细胞增殖抑制实验考察NGR-Lipo/BPEI/siRNA对MCF-7细胞增殖抑制，结果显示：抑制率具有浓度和时间依赖性，抑制率随着siRNA浓度的增加、作用时间的延长而增加；体外细胞摄取实验和流式细胞检测法考察体外MCF-7细胞对NGR-Lipo/BPEI/siRNA的摄取，结果显示：相对于siRNA，MCF-7细胞均能摄取NGR-Lipo/BPEI/siRNA、Lipo/BPEI/siRNA和BPEI/siRNA，且NGR-Lipo/BPEI/siRNA具有更高的转染效率；RT-PCR考察NGR-Lipo/BPEI/siRNA对Bmi-1 mRNA表达的影响，结果显示：NGR-Lipo/BPEI/siRNA能有效降低MCF-7细胞中Bmi-1基因mRNA的表达。　　 NGR-Lipo/BPEI/siRNA的制备方法简单，能有效保护siRNA、能在含血清的培养基中稳定存在，制成冻干粉后性质稳定；在体外能被MCF-7细胞摄取并抑制其增殖，降低MCF-7细胞中Bmi-1mRNA的表达。该复合物综合了阳离子复合物和阴离子脂质体的优点、克服了两者的缺点，相信在基因治疗中将会有很好的发展潜力。