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动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)在世界范围内发病率逐年增加,严重威胁人类的健康,与心脑血管疾病等紧密相关,糖尿病是其重要的危险因素。长期高血糖环境,使循环中白蛋白经糖基化修饰导致其结构和功能改变,从而发挥促动脉粥样硬化作用。相关研究证明内质网应激反应(endoplasmic reticulum stress,ERS),在动脉粥样硬化进展中发挥重要作用,可能与糖化白蛋白加速动脉粥样硬化进程相关。在各种损伤因素作用下,ERS可通过多种通路介导巨噬细胞凋亡,其中研究较广泛的是C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)途径。既往许多研究证实ATF6、IRE1、PERK通路均可诱导CHOP转录,引起细胞凋亡。因此,深入探讨其可能作用机制具有重要的临床意义。目的:本文旨在研究内质网应激感受器活化转录因子6(activating transcription factor 6,ATF6)是否介导晚期糖基化白蛋白(advanced glycated albumin,AGE-alb)所诱导的巨噬细胞凋亡,并阐明其可能的分子机制。方法:1体外培养RAW264.7巨噬细胞,给予AGE-alb(2、4和6 g/L)处理24 h,以正常白蛋白和ERS诱导剂衣霉素(tunicamycin,TM)处理24 h,分别作为阴性和阳性对照组,并采用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)技术沉默ATF6表达。2分别采用MTT法和AnnexinV-FITC/碘化丙碇双染法检测细胞活力和凋亡情况。3试剂盒测定培养基乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)和细胞内caspase-3活性。4免疫荧光细胞化学法检测ATF6核转位情况。5促凋亡蛋白C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)及ATF6蛋白表达变化通过采用Western方法检测其水平,实时荧光定量聚合酶链反应法检测CHOP mRNA表达变化。以P<0.05为差异有统计学意义。结果:1与TM相似,AGE-alb在蛋白和mRNA水平均显著上调ERS凋亡途径关键分子CHOP表达,该作用呈浓度依赖性。2 Western blot和免疫荧光细胞化学法均显示AGE-alb处理细胞后ATF6明显由胞浆向细胞核内转移。3采用siRNA技术沉默ATF6则明显减轻AGE-alb所致的细胞活力降低、LDH漏出、凋亡率增加及caspase-3活化,并可抑制AGE-alb所诱导的CHOP表达上调。结论:ATF6及其下游分子CHOP可介导AGE-alb所诱导的巨噬细胞凋亡。