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马立克氏病是由疱疹病毒引起鸡的最常见恶性淋巴肿瘤性疾病，自七十年代RL Witter和Okazaki等用火鸡疱疹病毒(HVT)成功地研制出MD疫苗以来，疫苗免疫已成为控制MD流行最有效的措施之一。尽管CVI988、SB1+HVT、Z4+HVT等免疫力较强的MD活疫苗相继应用于生产，但随着养鸡业集约化及MD流行病学变化，MD疫苗免疫效果差或免疫失败现象屡见不鲜，因此，国内外兽医工作者和研究人员探索了新的MD免疫策略——二次免疫。 本试验用HVT冻干苗、CVI988液氮苗和HVT+Z4二价苗分别一次和二次免疫SPF鸡进行实验室免疫效力实验，结果表明：三种疫苗一次免疫的保护指数为63.2～88.2，二次免疫的保护指数为88.2～94.1，二次免疫可以显著提高疫苗的保护率。在实验室条件下验证了MD疫苗二次免疫增强免疫鸡群抗MDV诱导肿瘤的免疫力是客观的现象。 目前，虽然学术界对MD二次免疫表示赞同，但依然不能对此作出科学的解释。根据最近几年国内外对MD致病机理和免疫机理的最新成果，结合我们对MD的一些新认识，认为再次免疫疫苗毒存在生产性感染并能增强免疫鸡群抗肿瘤免疫力。通过用间接免疫荧光试验(IFA)分析HVT一次免疫和二次免疫鸡血液淋巴细胞表面表达MDV相关的gB抗原动态，发现HVT一次免疫鸡在免疫后7天左右淋巴细胞表面表达gB抗原达到一个高峰(8.06％～13.07％)，随后很快下降并维持一个很低的水平(0.56％～2.41％)；而HVT二次免疫鸡在第一次免疫后gB抗原表达达到一个高峰，在第二次免疫后7天左右又达到一个gB抗原表达高峰(16.84％)，随后也下降并维持很低的水平(0.575％～2.08％)。说明再次接种的MD疫苗毒也从生产性感染开始进行增殖，在经一段时间后也转为潜伏感染。二次免疫使免疫鸡群受到了再一次大量免疫原刺激，在第一次免疫记忆存在的条件下，获得了更强的体液和细胞免疫应答，大大增强了抗肿瘤的免疫力。同时各免疫组扬州大学硕士研究生论文鸡用RBIB强毒攻毒后发现二次免疫组比一次免疫组更能抑制强毒在体内的复制。 用淋巴细胞增殖试验检测血淋巴细胞(MTT法)表明:二次免疫组鸡血液淋巴细胞增殖活性比一次免疫组鸡显著增强。流式细胞术(FCM)分析一次和二次免疫组鸡血液淋巴细胞cD3+、CD4+、CDS+T淋巴细胞的百分含量，发现在第二次免疫后7日龄左右时二次免疫组鸡的CD3+、CDS+T淋巴细胞的百分含量比一次免疫组鸡显著提高。初步验证了MD再次免疫疫苗毒存在生产性感染并增强免疫鸡群抗肿瘤免疫力。