口蹄疫抗原决定簇融合基因转化水稻的研究

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本文江口蹄疫的抗原决定簇融合基因O21- O14 -A21-HBcAg通过农杆菌介导法转入粳稻品种日本晴中。主要实验结果如下:确定了农杆菌介导的外源基因转入日本晴的最佳转化条件。实验认为在愈伤组织经过干燥预处理,农杆菌液OD600约为0.6,共感染时间为20 min,共培养培养基中AS浓度为50 μmol/L的条件下,能够获得较高的转化率;获得207棵再生植株,检测到193棵为转基因株系。再生植株根和叶片经组织化学染色检测到GUS基因的表达,PCR、斑点杂交及Southern杂交证实了外源基因已整合到日本晴基因组中;通过RT-PCR检测,判断目的基因已经正常转录;获得52个转基因株系的种子总共892粒,将部分种子萌发,培育成小苗,经组织化学染色和PCR鉴定,证实外源基因已遗传至子一代。
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