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【研究背景与目的】动脉粥样硬化（atherosclerosis,As）是心脑血管疾病的主要病理基础,近年来,由As所致的冠心病、脑卒中、心肌梗死等心脑血管疾病严重危害着人类的身心健康和生活质量,已成为严重的社会问题。研究表明,慢性应激已成为As性心血管疾病的重要独立危险因素。因此,阐明慢性应激影响As病变的分子机制,对As的防治具有重要的意义。在本研究中,我们将探讨高迁移率族蛋白B1（High mobility group box 1,HMGB1）/Toll样受体4（Toll-like receptor 4,TLR4）途径在慢性应激促进As病变中的作用及其机制。【方法】60只ApoE-/-雄性小鼠随机分为4组:对照组、慢性应激组、慢性应激+丙酮酸乙酯（HMGB1抑制剂）组、慢性应激+TAK242（TLR4抑制剂）组。首先,通过检测血清皮质酮水平确定小鼠应激模型是否建立。采用Elisa和Western Blot,检测慢性应激ApoE-/-小鼠As模型血清中HMGB1的释放含量和血管组织中HMGB1和TLR4的表达变化,以明确慢性应激对HMGB1的释放和TLR4激活的影响。随后,分别以HMGB1的选择性抑制剂丙酮酸乙酯（Ethyl pyruvate,EP）和TLR4的特异性抑制剂TAK-242干预,探讨抑制HMGB1释放和TLR4激活对慢性应激ApoE-/-小鼠As病变的影响。采用HE、油红O和Masson染色分别评估主动脉窦病理形态变化、粥样斑块面积大小和胶原含量变化;通过免疫荧光染色法,检测主动脉窦As斑块中巨噬细胞的表达与分布及平滑肌细胞的增殖与迁移水平;采用ELISA法检测小鼠血清皮质酮、HMGB1和IL-1β、和TNF-α的表达水平;通过Western Blot法检测小鼠主动脉血管组织中HMGB1、TLR4、PPARγ、LXRα、ABCA1等蛋白的表达。在体外慢性应激细胞模型中,分别以HMGB1抑制剂EP、TLR4抑制剂TAK-242和PPARγ激动剂罗格列酮（Rosiglitazone,RSG）干预糖皮质激素（皮质酮）共孵育的小鼠Raw 264.7巨噬细胞,观察阻断HMGB1/TLR4-PPARγ信号途径后对慢性应激巨噬细胞内脂质蓄积、HMGB1的释放、LXRα和ABCA1表达等的影响,以进一步阐明HMGB1/TLR4途径在慢性应激促As中的作用及其机制。通过油红O染色评估Raw 264.7巨噬细胞内荷脂程度;采用ELISA法检测细胞上清中HMGB1表达水平;采用Western Blot法检测巨噬细胞中TLR4、PPARγ、LXRα、ABCA1等蛋白的表达。【结果】1.与正常对照组相比较,慢性应激组（简称应激组）ApoE-/-小鼠血清的皮质酮、及其炎症因子IL-1β和TNF-α的水平显著升高,主动脉的As病变面积及HMGB1、TLR4和IL-1β蛋白的含量显著增加,而PPARγ、LXRα和ABCA1的表达则明显降低;2.与应激组相比较,EP组和TAK-242组小鼠主动脉的As病变面积、巨噬细胞数量和炎症因子IL-1β蛋白的表达显著减少,而病变处的胶原和平滑肌细胞含量则显著增多;3.与应激组相比较,EP组和TAK-242组小鼠血管壁PPARγ、LXRα和ABCA1的表达显著升高;4.EP、TAK-242和罗格列酮干预均能显著抑制皮质酮诱导的Raw264.7巨噬细胞源性泡沫细胞形成、降低上清液中HMGB1的含量,但显著升高其PPARγ、LXRα和ABCA1的表达。【结论】1.慢性应激通过激活HMGB1/TLR4途径下调PPARγ、LXRα、ABCA1蛋白的表达,以诱导血管壁的慢性炎症而促进ApoE-/-小鼠AS的发生和发展。