柑橘属中的类黄酮含量丰富,易于分离,具有显著的药理学作用。橙皮苷是柑橘属中含量丰富的一种类黄酮,因其对血管的保护作用被广泛用作心血管良药,其在食品、化妆品、化工等方面的广泛作用更增加了人们对橙皮苷研究的兴趣。橙皮苷大量存在于废弃的柑橘果皮中,目前还没有得到充分利用。本文系统研究了衢州椪柑皮中橙皮苷的提取与纯化方法。现将主要研究结果报告如下: 1、用自制含NaOH溶液的硅胶板,采用乙酸乙酯:甲醇:水=10:3:2的展开剂,283nm紫外灯下可清楚的看到橙皮苷斑点呈黄绿色,斑点清晰圆润。橙皮苷与杂质得到较好分离。 2、利用硝酸铝体系与橙皮苷形成络合物的原理,采用分光光度法测定橙皮苷含量,简单快速。条件一致时,可比性较强,为探索最佳提取工艺和中间指标控制提供了简单有效的评价方法。 3、运用反相液相色谱法测定橙皮苷,重复性、稳定性都较好,色谱柱选用Dikma C18柱(4.6×250mm 5μm),流动相:甲醇:无水醋酸:水=180:18:250;检测波长:283nm,流速:1.0ml/min,进样量:自动进样,柱温:室温27℃。 4、对橙皮苷的甲醇提取条件进行了系统研究,通过正交和验证性实验确定了提取最佳条件,即1g:80ml分析纯甲醇,于80℃下索氏提取4小时。反复三次提取,确定提取液中无橙皮苷剩余(紫外检测283nm下无吸收)。在此条件下,对采自10月30日,11月17日和12月1日的三批椪柑皮分别粉碎至40目(0.45mm),10目(2mm),2-4mm,研究不同采摘时间和粉碎大小对提取量的影响。结果发现采摘时间对提取有显著影响,随着时间的后推,提取量显著减少。粉碎大小40目与10目之间没有显著差异,而40目与2-4mm有显著差异。可见为提高提取量,提取粒度以小于2mm为宜。 因此,10月30日采摘并粉碎到2mm的椪柑皮可以提取最大量的橙皮苷,取1g皮用最佳工艺进行提取,可得64.04mg橙皮苷(HPLC测定),即此皮中橙皮苷含量为6.4%。并假设该皮中所含全部橙皮苷为64.04mg,提取率以此为标准计算。 5、椪柑皮的乙醇提取方法更有利于椪柑皮资源的综合利用。本文研究了乙醇和甲醇的提取率差异,并对乙醇提取的最优条件进行了研究。乙醇提取的最佳工艺是: