百合是百合科属的多年生鳞茎草本植物,有较高的食用和药用价值。随着种植面积逐年增加,百合枯萎病逐年加重,降低了白合的品质及产量。对百合枯萎病通常使用化学药剂进行防治,但长期使用化学农药不仅增强了病原菌的抗药性,还破坏了土壤的生态平衡,造成了环境污染。生物防治是一种对环境友好,且不易产生抗药性的有效方法。因此,本研究旨在从土壤中分离筛选对百合枯萎病有显著抑制作用的拮抗菌,并对拮抗能力最强的菌株进行鉴定,研究目标菌株的抑菌谱、促生、生防效果及其发酵条件。主要结论如下:1.菌种筛选与鉴定;以百合枯萎病菌作为靶标菌,从土样中分离筛选出了 37株具有拮抗效果的菌株。菌株Y25对百合枯萎病病菌抑菌作用最强,抑菌圈直径为32.75 mm;菌株Y25对辣椒疫霉(Phycomycetes)、亚麻枯萎病(Fusar ium lini Bolley)、亚麻炭疽病(Fla Anthrax)、亚麻枯萎病(Flax wilt)、黄瓜枯萎病菌(Fusarium wilt of cucumber)、油菜菌核病菌(Rape sclerotia)抑制作用较好;通过革兰氏染色,16S rDNA序列的分析,再结合接触酶、氧化酶、淀粉水解、MR、VP等测定,确定Y25为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。2.室内盆栽实验表明,与对照组比较,在不加Y25生防菌的情况下,发病率为53.5%,病情指数为37.77;采用浓度为1×108 cfu/mL的Y25菌株发酵液处理后,发病率低至17.7%,病情指数9.44,防病效果高达66.79%。3.大田栽培试验表明,在浓度为1×108 cfu/mL菌株Y25对百合枯萎的防治效果为60.34%;与对照组比较,平均株增加了 35.23%,平均茎粗增加了 42.47%,植株总质量(除种球)增加了 221.16%,平均种球重量增加了 25.91%。4.摇瓶发酵发酵工艺优化 通过单因素实验和响应面优化,得到了菌株Y25摇瓶发酵产芽孢的最佳条件,在装液量75 mL,pH 7.5,玉米粉16.3 g/L,蛋白胨10g/L,KH2PO4 0.8 g/L,接种量2%,转速240 rpm,温度40℃条件下,培养时间36h,实测芽孢浓度为3.39×1010 cfu·mL-1,芽孢浓度提高了 143倍。