猪源肠外致病性大肠杆菌的分离鉴定及致病性评价

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猪源肠外致病性大肠杆菌(Extraintestinal Pathogenic Escherichia coli,ExPEC)是一类主要引起猪肠外组织感染的重要致病性病原菌;如引起猪的肾炎、肺炎、败血症以及脑膜炎等症状;且ExPEC易与其他疾病发生继发感染或混合感染,给养殖业造成了一定的经济损失。动物源的肠外致病性大肠杆菌具有人畜共患的特性,对于人类的健康也构成了一定的威胁。基于猪源ExPEC所带来的危害,开展了本试验。具体研究内容和结果如下:1.对合肥周边送检的病猪,通过无菌操作采集病猪的肠外组织(心、肝、脾、肺、肾)进行分离鉴定,同时对其进行病理组织学试验,得到30株猪源ExPEC;病理切片结果显示:病猪肝脏的肝细胞发生变性,肝索排列紊乱;肺脏支气管管腔内有大量炎性细胞浸润,有淋巴细胞、嗜中性粒细胞;2.继而对所分离到猪源ExPEC菌株进行种系发育分群试验以及毒力基因检测,试验结果表明:A群4株、B1群15株、B2群5株、D群6株,毒力基因的检出率分别为vaT(70%)、hlyD(20%)、iutA(33.33%)、kpsMII(23.33%)、fyuA(16.67%)、ireA(3.33%)、afa(3.33%),其中vaT、iutA的扩增率为最高;3.将本试验中筛选到的含有3个及3个以上毒力基因的菌株进行动物致病性试验,观察小鼠状态及死亡情况。通过病理组织学发现:攻毒感染小鼠的肝脏肝脏瘀血,有大量炎性细胞浸润;肺脏支气管被覆假复层柱状纤毛上皮脱落,肺泡腔内有大量炎性细胞浸润,主要是以淋巴细胞为主且以淋巴细胞为主;肾脏肾小球内有淤血,胞浆淡然,空泡样变性;心脏表现为心肌炎,心肌间隙扩大,有轻微的水肿现象;4.将本试验中筛选到的30株猪源ExPEC菌株进行了抗生素敏感试验,试验结果显示:所有菌株都对PB比较敏感,大多数菌株对头孢吡肟、磷霉素、米诺环素及大观霉素较为敏感,耐药率分别为:10%、10%、16.67%、30%;但对氨苄西林、林可霉素、杆菌肽以及利福平的耐药率均为100%,所有的菌株都表现10重以上的耐药,最高达到19重耐药,杆菌肽+阿莫西林+甲氧苄氨嘧啶+万古霉素+多西环素+卡那霉素+氨苄西林+林可霉素+氟苯尼考+利福平+复方新诺明占到16.7%。本试验主要通过对临床分离到的猪源ExPEC进行研究,进一步了解该类菌群的流行病学规律,为指导猪源ExPEC的诊断与防治提供科学依据。
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