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目的神经母细胞瘤(neuroblastoma, NB)是起源于胚胎期交感神经系统神经嵴细胞的恶性肿瘤,是儿童时期最为常见的恶性肿瘤之一。目前研究认为,NB分化是一个多种基因参与的复杂过程,细胞形态分化中许多癌基因的表达调控发生相应的改变。Aurora-A激酶是近年来研究较热门的一个有丝分裂蛋白激酶,它是丝氨酸/苏氨酸激酶家族的一员,参与细胞中心粒和染色体分离的调节,在细胞的有丝分裂的进行中发挥至关重要作用。该基因过度表达可引起中心粒异常、染色体不稳定和肿瘤形成,在人类多种恶性肿瘤的发生发展过程中起到了至关重要的作用。本研究用实时荧光定量PCR方法检测Aurora-A基因在NB中的表达情况,并探讨其与临床分期及预后的关系,旨在发现新型、独立有效的预后标记物。材料及方法一、实验材料收集中国医科大学附属盛京医院2005年-2009年20例NB冻存组织和2007-2010年15例伴有骨髓转移的NB骨髓标本。35例患儿就诊年龄18天-9岁,小于1岁患儿15例,大于等于1岁患儿20例。全部病例均经病理检查确诊。根据Evans分期:低分期组13例(Ⅰ期5例,Ⅱ期8例),中位生存期41.5月。高分期组22例(Ⅲ期7例,Ⅳ期15例),中位生存期25.0月。另取10例节细胞神经瘤冻存组织作对照。二、实验方法从骨髓中提取单个核细胞;从单个核细胞中和捣碎的组织中提取总的RNA;将RNA逆转录成cDNA;以cDNA模板,以Aurora-A为目的基因,以GAPDHA为内参基因,采用实时荧光定量PCR SYBR GreenⅠ方法检测上述标本中Aurora-A基因mRNA水平的表达情况;采用SPSS13.0软件进行统计学分析。结果1、Aurora-A基因在10例节细胞神经瘤对照组中无表达,在35例NB标本中都存在不同程度的表达,两组具有显著差异(P<0.01);2、Aurora-A基因在低分期组中低表达(0.225+0.096),高分期组中高表达(0.659±0.079)(P<0.01):3、Aurora-A基因表达水平的高低与年龄有关,小于1岁者表达低(0.392±0.163),大于等于1岁者表达高(0.578±0.237)(P<0.05);4、Aurora-A基因表达水平的高低与生存时间呈负相关(P<0.01)。结论1、Aurora-A基因在恶性NB中高表达,可能参与NB的恶性增殖;2、Aurora-A基因高表达患儿预后不良,可作为NB分子生物学预后标记物。