中草药单体和锌、硒对体外培养猪脾脏淋巴细胞增殖及其分泌功能的影响

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本试验以原代培养猪脾脏淋巴细胞为模型,研究了黄芪多糖、刺五加皂苷B、人参皂苷F3、绿原酸、党参炔苷、硫酸锌、甘氨酸锌、亚硒酸钠和硒代蛋氨酸等对猪脾脏淋巴细胞体外增殖和分泌功能的影响,为研制免疫增强剂提供理论依据。采用CCK-8法检测了上述物质单独作用和与ConA或LPS或CY协同作用于淋巴细胞时,对其增殖的影响;采用ELISA法检测了黄芪多糖、刺五加皂苷B、绿原酸、党参炔苷、甘氨酸锌和硒代蛋氨酸等在适宜浓度与ConA协同作用于淋巴细胞时,对其分泌IL-2、IL-4和IL-10水平的影响。结果表明:①黄芪多糖在100和200 μg·mL-1时单独作用和与ConA或LPS协同作用于猪脾脏淋巴细胞均能显著促进其增殖(P<0.05),且能缓解环磷醜胺的抑制(P<0.05);刺五加皂苷B在50 μg·L-1时单独作用和与LPS协同作用能显著促进淋巴细胞增殖(P<0.05),但对环磷酰胺的免疫抑制没有缓解;绿原酸和党参炔苷在200μg·mL-1时单独作用和与ConA或LPS协同作用于猪脾脏淋巴细胞均能显著促进其增殖(P<0.05),且能缓解环磷酰胺的抑制(P<0.05);人参皂苷F3在5 μg·mL-1和20μg·mL-1时能协同LPS促进猪脾脏淋巴细胞增殖(P<0.05)。②黄芪多糖和刺五加皂苷B在50μg·mL-1时能促进ConA诱导的猪脾脏淋巴细胞IL-4和IL-10的分泌(P<0.05);绿原酸和党参炔苷在100和200μg·mL-1时均能促进IL-2、IL-4和IL-10的分泌(P<0.05);黄芪多糖+绿原酸的复配和刺五加皂苷B+绿原酸的复配能促进淋巴细胞IL-2、IL-4和IL-10的分泌(P<0.05)。③各浓度硫酸锌对猪脾脏淋巴细胞增殖无显著促进作用(P>0.05),在40和80μmol·L-1时显著抑制ConA诱导的猪脾脏淋巴细胞增殖(P<0.05);甘氨酸锌在40μmoI·L-1时促进猪脾脏淋巴细胞增殖效果最佳(P<0.05),甘氨酸锌(ZnGly)在10、20、40、80mol·L-1均能线性地缓解CY对淋巴细胞的抑制(P<0.05)。亚硒酸钠对猪脾脏淋巴细胞增殖无促进作用(P>0.05),硒代蛋氨酸在0.05、0.1和0.5 μmol·L-1时单独作用促进猪脾脏淋巴细胞增殖(P<0.05)。④甘氨酸锌在20μmol·L-1时能显著促进猪脾脏淋巴细胞分泌IL-2(P<0.05),在40μmol·L-1时能显著促进猪脾脏淋巴细胞分泌IL-4(P<0.05),在20和40μmol·L-1时均显著促进猪脾脏淋巴细胞分泌IL-10(P<0.05);硒代蛋氨酸在0.1和0.5 μmol·L-1时相比对照组均促进猪脾脏淋巴细胞分泌IL-2和IL-10(P<0.05),对猪脾脏淋巴细胞分泌IL-4作用不显著(P<0.05);甘氨酸锌+硒代蛋氨酸复配组与对照组相比均能显著促进猪脾脏淋巴细胞分泌IL-2、IL-4和IL-10(P<0.05)。综上所述,黄芪多糖、刺五加皂苷B、绿原酸、党参炔苷、甘氨酸锌和硒代蛋氨酸均能促进体外猪脾脏淋巴细胞增殖,还可促进ConA诱导的淋巴细胞IL-2、IL-4和IL-10分泌。
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